扩增程序(Amplification Program)是PCR反应的核心控制参数,它定义了温度变化和循环次数的逻辑关系。QuantStudio 5通过精密的Peltier温控模块实现快速且均匀的温度切换。
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扩增程序(Amplification Program)是PCR反应的核心控制参数,它定义了温度变化和循环次数的逻辑关系。QuantStudio 5通过精密的Peltier温控模块实现快速且均匀的温度切换。
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系统初始化(System Initialization)是QuantStudio 5荧光定量PCR仪在每次开机或首次安装后的关键准备环节。该过程通过对硬件模块、光学检测系统、温控单元及软件功能进行全面检测、加载与校准,确保仪器在最优状态下运行。
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样品布局(Sample/Plate Setup)是赛默飞QuantStudio 5实时荧光定量PCR仪实验配置的核心环节之一。它决定了PCR板上每个孔的样品类型、检测靶标、荧光通道及对应的分析逻辑,是实现数据采集、曲线绘制和结果计算的基础。
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检测灵敏度是衡量实时荧光定量PCR(Real-Time Quantitative PCR,qPCR)仪性能的重要指标之一。它反映了仪器对极低拷贝数核酸模板的检测能力,即在保持扩增特异性和准确性的前提下,设备能可靠区分荧光信号与背景噪声的最小反应水平。
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该软件系统集实验设计、仪器控制、数据采集、结果分析与报告生成于一体,支持多种实验模式(如相对定量、绝对定量、基因分型、熔解曲线分析等)。其图形化操作界面、自动分析算法和可定制报告功能,使得定量PCR实验从设置到结果导出实现高度自动化与智能化。
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QuantStudio 5的荧光检测基于实时监测PCR反应过程中荧光信号强度的变化,从而计算扩增效率与模板浓度。
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在实时荧光定量PCR(Real-Time PCR)实验中,扩增曲线(Amplification Plot)是最核心的图像分析结果之一。它直观反映了PCR扩增过程中荧光信号强度随循环次数变化的动态过程,是判断扩增效率、计算Ct值以及评估体系特异性的关键依据。
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模板浓度校准是指通过对已知浓度的核酸模板进行扩增反应,建立模板浓度与Ct值的标准曲线,以此确定未知样品中模板的实际浓度。荧光定量PCR的检测信号与初始模板量成对数关系,理论上模板越多,Ct值越小。
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在PCR实验完成后,科学地导出和管理数据是确保实验可追溯性、可比性与可共享性的关键环节。QuantStudio 5提供多种数据导出方式,支持不同分析深度与文件格式,包括原始信号数据(.eds文件)、分析结果文件(.xls/.csv/.pdf)及图像格式输出(.png/.tiff)。
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赛默飞荧光定量PCR仪QuantStudio 5(Thermo Fisher Scientific QuantStudio 5 Real-Time PCR System)是一款集高精度热循环控制、灵敏荧光检测与智能化数据分析于一体的实时定量PCR系统。
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该系统不仅保证PCR反应在变性、退火、延伸三个阶段的温度精准切换,还通过上盖恒温加热防止冷凝效应,同时内置多点温度传感器,实现实时监测与自校正。其整体设计兼顾了热传导效率、能耗管理与长期稳定性,是QuantStudio系列仪器的重要技术基础。
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标准曲线是基于PCR扩增的指数反应特性建立的数学模型。PCR反应中产物数量理论上每个循环翻倍,荧光信号与DNA产量呈正比。
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