在酶联免疫吸附测定(ELISA)、比色法、酶动力学分析等需要定量分析的实验中,酶标仪(Microplate Reader)广泛用于测定样品吸光度或荧光强度。为将测得的信号值转换为实际浓度,实验人员必须建立标准曲线(Standard Curve)。标准曲线的点数,即标准品的浓度梯度数量,是影响定量准确性、线性度、重现性及灵敏度的关键参数之一。
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在酶联免疫吸附测定(ELISA)、比色法、酶动力学分析等需要定量分析的实验中,酶标仪(Microplate Reader)广泛用于测定样品吸光度或荧光强度。为将测得的信号值转换为实际浓度,实验人员必须建立标准曲线(Standard Curve)。标准曲线的点数,即标准品的浓度梯度数量,是影响定量准确性、线性度、重现性及灵敏度的关键参数之一。
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在酶联免疫吸附试验(ELISA)中,标准曲线的拟合对于准确地定量分析未知样品至关重要。根据实验数据的特性,常用的曲线拟合模型包括线性和非线性模型。以下是常见的线性与非线性拟合模型及其适用情况:
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1. 单波长检测
单波长检测是最基本的设置,选择样品在特定波长下的最大吸收峰进行测量。常见的波长包括:
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450 nm:适用于TMB底物的ELISA检测。
492 nm:适用于OPD底物的ELISA检测。
405 nm:适用于PNPP底物的碱性磷酸酶反应。
562 nm:适用于BCA法的蛋白定量。
595 nm:适用于考马斯亮蓝法的蛋白定量。
随着荧光检测技术在生命科学、药物筛选、免疫学和分子诊断领域的广泛应用,酶标仪(microplate reader)作为高通量荧光检测的重要平台,其性能调节的合理性日益受到重视。在荧光法检测中,增益(Gain)设置是影响信号强度、灵敏度和数据稳定性的关键参数。不同实验体系对荧光强度的需求差异巨大,如何科学选择合适的增益范围,是保证检测准确性与动态范围的重要环节。
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酶标仪在化学发光法(Chemiluminescence)检测中,出现信号饱和现象是一个常见且需重点关注的问题。饱和现象不仅影响数据的准确性和重复性,还可能对实验结果的解读产生误导。本文将深入探讨化学发光法中引发饱和现象的原因,并提出相应的解决策略。
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某些培养基成分(如酚红、血清)具有自发荧光,可能增加背景信号。使用无酚红、无血清或低自发荧光的培养基和缓冲液可以显著降低背景干扰
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酶标仪是现代生物实验室中不可或缺的检测设备,被广泛应用于酶活性分析、免疫检测、细胞毒性评价、药物筛选等多个领域。在使用微孔板进行高通量检测时,每个孔位通常承载不同的反应体系或样本,而**孔间交叉污染(well-to-well contamination)**将直接影响实验准确性、重复性与数据可解释性,是科研与质量控制工作中必须高度重视的问题。
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酶标仪在现代生物学和医学研究中广泛应用,其检测结果的准确性和重复性受到多个因素的影响,其中微孔板的孔位排列和管道布局是关键因素之一。
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在现代分子生物学、免疫学、药物筛选、酶学和细胞学等领域,酶标仪(Microplate Reader)已经成为高通量、高效率、定量分析的核心工具。作为酶标仪检测体系中不可或缺的组成部分,微孔板(又称酶标板)不仅仅是样品的物理承载体,其本身的材质、表面特性、透明度、吸附性、化学惰性等多重属性,都对实验数据的准确性、灵敏度、重复性乃至实验成本产生了深刻影响。当前主流微孔板以塑料(主要为聚苯乙烯、聚丙烯)为主,也有一定比例的玻璃微孔板在特殊应用中被采用。本文将以科学、系统的方式,从原理到实际操作,全面剖析不同材质酶标板对实验结果的影响,帮助实验室合理选型,提升数据可靠性。
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酶标仪(Microplate Reader)是一种基于多孔微板(通常为96孔或384孔)的多通道光学检测仪器,广泛应用于生命科学、临床检验、药物研发及环境监测等领域。微孔板不仅作为样品载体,还直接参与信号捕获与传递,其材料与颜色对检测结果的灵敏度、特异性和背景噪声等有重要影响。其中,黑色孔板与透明孔板作为最常见的两种微板类型,在应用场景与技术参数上存在显著差异,正确选择孔板类型对于提升实验效率与数据可靠性至关重要。
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化学发光法(chemiluminescence assay)作为一种高灵敏度、宽线性范围的生物分析技术,已经成为现代分子诊断、免疫检测、药物筛选、信号通路研究等领域的重要工具。酶标仪作为核心检测平台,其性能受多种因素影响,而“孔板材质及颜色”是影响信号捕获、背景噪音、检测灵敏度及定量准确性的关键环节。在化学发光实验中,白色孔板与黑色孔板的选择,对结果有着至关重要的影响。
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微孔板是现代分子生物学、免疫学、细胞学、药物筛选等实验中最常用的标准耗材,国际通用尺寸标准源自SBS(Society for Biomolecular Sciences)。
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