赛默飞紫外分光光度计(Thermo Fisher UV-Vis Spectrophotometer)是赛默飞世尔科技公司(Thermo Fisher Scientific)推出的一系列高性能实验室仪器,用于测量物质在紫外-可见光区域内的吸光度。紫外分光光度计能够分析样品的光学性质,主要用于定量检测、质量控制和物质鉴定,广泛应用于化学、生物学、制药、环境监测等多个领域。赛默飞凭借其在分析仪器领域的强大研发能力,为全球科学家和工程师提供了一系列性能优异、操作简便的紫外分光光度计。
一、紫外分光光度计的工作原理
紫外分光光度计的工作原理基于朗伯-比尔定律(Beer-Lambert Law),该定律描述了溶液中溶质浓度与吸光度之间的线性关系。仪器通过紫外光源发射特定波长的光线,穿过待测样品,检测光的吸收程度。吸光度的大小与样品浓度成正比,因此可以通过测量吸光度来确定样品中的溶质浓度。
朗伯-比尔定律的公式为:
A=ϵ⋅c⋅lA = \epsilon \cdot c \cdot lA=ϵ⋅c⋅l
其中:
AAA 是吸光度,
ϵ\epsilonϵ 是摩尔吸光系数,
ccc 是样品的浓度,
lll 是光程(通常为1厘米)。
紫外分光光度计通过测量样品吸收不同波长光的情况,绘制吸收光谱,用于分析样品的物质结构、成分和浓度。
二、赛默飞紫外分光光度计的核心技术特点
赛默飞的紫外分光光度计系列融合了现代光谱技术,能够为用户提供卓越的测量性能和可靠的结果。以下是其核心技术特点:
1. 宽波长范围和高灵敏度
赛默飞紫外分光光度计覆盖紫外至可见光的波长范围,通常为190 nm至1100 nm,适用于检测多种物质。高灵敏度的检测器(如光电倍增管)能够准确捕捉微弱的光信号,确保分析的准确性,特别适用于低浓度样品的检测。
2. 双光束设计
双光束设计是赛默飞紫外分光光度计的显著特点之一。双光束系统将光源一分为二,一束通过样品,另一束作为参比光,通过参比光的测量来消除外界干扰因素,如光源波动或环境光的影响,从而提高数据的准确性和稳定性。
3. 光源技术
赛默飞的紫外分光光度计通常采用氘灯和钨灯作为光源。氘灯用于提供紫外区域的光(190-400 nm),而钨灯用于可见光区域(400-1100 nm)的检测。这种组合光源保证了仪器在整个波长范围内具有良好的光输出稳定性和高效的光谱覆盖。
4. 快速波长扫描和自动化操作
赛默飞紫外分光光度计具有快速波长扫描功能,能够在几秒钟内完成对样品的全波长扫描,生成完整的吸收光谱。此外,自动化的软件控制功能使得用户可以预设实验条件,自动执行多种分析任务,减少了人工操作带来的误差,并提高了实验的重复性。
5. 光栅和滤光片技术
光栅和滤光片是紫外分光光度计的重要光学元件,负责将复合光分解为单色光。赛默飞的高精度光栅和滤光片技术能够精确控制和选择特定波长的光,以满足不同应用的需求。高分辨率的光栅确保了光谱信号的清晰度和准确性,适用于复杂样品的分析。
6. 便捷的用户界面和软件功能
赛默飞紫外分光光度计配备了易于使用的触摸屏界面和专用软件,如Thermo Scientific™ INSIGHT™ 软件,用户可以通过直观的操作界面进行波长选择、数据处理、光谱图绘制等操作。软件还支持数据的自动存储、分析、导出和报告生成,便于实验数据的记录和追溯。
三、赛默飞紫外分光光度计的应用领域
赛默飞紫外分光光度计在多个领域中具有广泛的应用,其高精度和灵活性使其能够满足不同行业的分析需求。
1. 生命科学
蛋白质定量:紫外分光光度计常用于蛋白质浓度的定量分析,如利用280 nm波长测量蛋白质吸收峰来确定样品中的蛋白质含量。常见的分析方法包括Bradford法、Lowry法和BCA法。
核酸检测:紫外分光光度计广泛应用于DNA、RNA的浓度和纯度检测。通常使用260 nm波长来检测核酸,280 nm波长用于评估蛋白质污染,通过计算260/280比值来评估样品的纯度。
酶动力学研究:利用紫外分光光度计监测酶催化反应中底物的吸收变化,从而研究酶活性和动力学参数。
2. 制药行业
药物分析:赛默飞紫外分光光度计常用于药物制剂中活性成分的定量分析。通过测定药物在特定波长的吸光度,可以确定其浓度和纯度,保证药物的质量和一致性。
溶解度研究:在药物开发过程中,紫外分光光度计用于测量药物在不同溶剂中的溶解度,为药物配方设计提供数据支持。
3. 化学分析
有机化合物分析:紫外分光光度计可以检测有机化合物的吸收光谱,用于鉴定化学结构和确定浓度。例如,芳香族化合物通常在200-400 nm之间具有特征吸收峰,通过吸收峰的识别可以分析其结构。
金属离子测定:某些金属离子与特定试剂反应后会产生颜色变化,通过紫外分光光度计测量吸收光谱,可以进行金属离子的定量检测,如铜离子、铁离子等。
4. 环境监测
水质分析:紫外分光光度计在环境科学中常用于检测水样中的污染物,如硝酸盐、亚硝酸盐、磷酸盐等。通过检测这些化合物在紫外区域的吸光度,可以判断水体污染情况并进行定量分析。
空气和土壤分析:紫外分光光度计还可以用于空气和土壤样品中的有机污染物检测,特别是对多环芳烃、苯等挥发性有机化合物的分析。
5. 食品和饮料行业
食品添加剂和防腐剂检测:紫外分光光度计常用于食品添加剂(如维生素、色素、防腐剂等)的定量分析,确保食品配方的安全性和一致性。
质量控制:在饮料行业,紫外分光光度计用于检测饮料中的成分,如糖类、咖啡因、酚类化合物等,帮助生产商监控产品质量。
四、赛默飞紫外分光光度计的型号及产品系列
赛默飞紫外分光光度计包括多个型号和产品系列,以满足不同实验室的需求。以下是赛默飞常见的紫外分光光度计产品系列:
Thermo Scientific™ Evolution™ 系列
Evolution 201 和 220:这两款型号具有双光束设计、宽波长范围、自动化操作功能,适用于科研和工业实验室的高精度分析。
Evolution One 和 Evolution One Plus:这些型号配备直观的触摸屏和INSIGHT软件,操作简便且性能稳定,适用于多样化的日常实验室工作。
NanoDrop™ 系列
NanoDrop 2000/2000c:专为微量样品设计,无需比色皿,可直接滴加样品进行紫外可见光分析,适用于DNA、RNA和蛋白质的定量分析。
NanoDrop One/OneC:通过增强的软件和更高的检测灵敏度,NanoDrop One系列适合更广泛的生命科学和临床研究应用。
五、总结
赛默飞紫外分光光度计是一款多功能、精确、可靠的分析仪器,能够广泛应用于生命科学、化学、制药、环境监测等多个领域。其高灵敏度、宽波长范围、先进的光源和自动化功能使其在定量分析、质量控制和科研应用中表现出色。无论是日常实验室操作还是高通量分析,赛默飞紫外分光光度计都能够为用户提供高精度和高效率的解决方案。