赛默飞(Thermo Fisher Scientific)是全球领先的实验室设备制造商,其酶标仪系列在生命科学研究、临床诊断、药物筛选等领域表现出色。本文将从酶标仪的基本功能、核心型号、使用指南、应用领域和常见问题解答几个方面,详细介绍赛默飞酶标仪的优势和使用方法。
一、酶标仪的基本功能
酶标仪,通常称为微孔板读数仪(Microplate Reader),是实验室用于定量分析微孔板中液体样品的光学设备。它的核心功能包括:
吸光度检测:用于测定样品在特定波长下的吸光度,适合**酶联免疫吸附实验(ELISA)**等实验。
荧光检测:通过测定样品发射的荧光强度来定量分析反应产物,常用于荧光素标记实验。
发光检测:用于化学发光检测,常见于基因报告系统或药物筛选。
时间分辨荧光检测(TRF):这种模式用于研究样品中的荧光寿命,适合复杂的生物化学反应。
多波长扫描:能够在一定范围内自动扫描不同波长,从而获得样品的光谱信息。
二、赛默飞酶标仪的核心型号
Thermo Scientific Multiskan FC
特点:这是赛默飞的经典型号,支持96孔和384孔微孔板,具有吸光度检测功能,适合ELISA和蛋白质定量实验。其340 nm至850 nm的宽波长范围满足多种实验需求。
应用:广泛用于免疫学研究、细胞学研究和酶学实验。
价格范围:约为**$6,000至$7,000**。
Thermo Scientific Varioskan LUX
特点:多功能酶标仪,支持吸光度、荧光、发光和时间分辨荧光检测。该设备具有自动化功能,能够多模式测量,适合高通量实验。
应用:适用于高通量药物筛选、基因研究、细胞活性分析。
价格范围:约为**$15,000至$20,000**。
Thermo Scientific Fluoroskan
特点:专为荧光和化学发光检测设计,具备高灵敏度和广泛的应用,能够检测96孔和384孔板中的样品。
应用:适合用于药物筛选、基因报告基因检测等高灵敏度实验。
价格范围:约为**$10,000至$15,000**。
三、赛默飞酶标仪的使用指南
准备与设置:
安装与校准:在首次使用前,确保设备正确连接电源并安装了必要的软件(如Thermo Scientific提供的SkanIt软件)。设备需要进行光学校准,确保检测准确性。
加载微孔板:将96孔或384孔微孔板放置在设备的托盘上,确保孔板对齐,避免液体溢出。
实验参数设置:
选择模式:根据实验需求选择合适的检测模式(吸光度、荧光、发光等)。
设置波长:如果进行吸光度实验,设置所需的检测波长。常见的ELISA波长为450 nm,蛋白质定量通常为595 nm。
振荡与孵育:某些实验需要微孔板振荡或孵育,这时可以设置振荡强度和时间,以确保样品充分混合。
数据读取与分析:
启动检测:设置完成后,启动检测过程,设备将自动读取每个孔中的信号。
分析数据:使用赛默飞的SkanIt软件,可以实时查看数据,并生成标准曲线或其他分析结果,方便用户导出和进一步处理。
四、应用领域
酶联免疫吸附实验(ELISA)
ELISA实验是酶标仪最常见的应用领域之一,赛默飞酶标仪能够在多波长范围内精确测定吸光度,快速生成标准曲线,定量分析抗体或抗原的浓度。蛋白质定量
酶标仪广泛应用于蛋白质定量实验,如BCA法、Bradford法等,通过吸光度测定样品中蛋白质的浓度,生成精确的定量结果。细胞活力检测
赛默飞的酶标仪特别适合用于MTT、CCK-8等细胞活力检测实验,通过检测细胞代谢产物的吸光度或发光信号,评估细胞活性或毒性。药物筛选
赛默飞的多模式酶标仪(如Varioskan LUX)在药物筛选中表现出色,通过多种检测模式(吸光度、荧光、发光等)筛选化合物对特定靶标的影响。
五、常见问题及解决方案
数据偏差或噪声
可能原因:微孔板位置未对齐或设备未校准。
解决方案:确保微孔板放置正确,并定期校准设备,清洁光学部件以避免灰尘或污染影响。
液体溢出或样品飞溅
可能原因:液体加入量过多或振荡设置过高。
解决方案:适当减少每个孔的液体体积,并调整振荡速度。
软件崩溃或数据丢失
可能原因:计算机硬件或软件冲突。
解决方案:确保使用赛默飞官方提供的软件版本,并定期备份实验数据。
六、维护与保养
定期清洁设备:在每次实验后,使用适当的清洁剂清洁微孔板托盘和光学检测部分,防止残留试剂影响后续实验。
校准与维护:定期校准酶标仪,确保检测的准确性。此外,设备的液体传输部分需要定期维护,避免管道堵塞或设备损坏。
七、总结
赛默飞酶标仪以其高灵敏度、多功能性和高通量处理能力在全球实验室中广泛应用。无论是基础研究、临床检测,还是复杂的药物筛选,赛默飞酶标仪都能提供稳定、准确的结果。选择合适的型号,并根据具体实验需求正确使用设备,可以显著提高实验效率和结果的可靠性。