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赛默飞分光光度计Evolution测量模式

赛默飞 Evolution 系列分光光度计是一款高性能的紫外-可见光光谱分析仪器,广泛应用于生命科学、环境监测、制药、食品安全等领域。其核心优势之一是多样化的测量模式,能够满足从基础定量分析到复杂动力学研究等多种实验需求。

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一、引言

赛默飞 Evolution 系列分光光度计是一款高性能的紫外-可见光光谱分析仪器,广泛应用于生命科学环境监测、制药、食品安全等领域。其核心优势之一是多样化的测量模式,能够满足从基础定量分析到复杂动力学研究等多种实验需求。

本文将对 Evolution 系列分光光度计的五种主要测量模式进行详细介绍,帮助用户充分理解各模式的原理、应用场景及操作要点。


二、测量模式概述

Evolution 系列分光光度计配备了 Thermo Scientific Insight Pro 软件,提供以下五种测量模式:

  1. 固定波长模式(Fixed)

  2. 扫描模式(Scan)

  3. 定量分析模式(Quant)

  4. 动力学测量模式(Kinetics)

  5. 实时显示模式(Live Display)

每种模式针对不同的实验需求,提供灵活的配置和操作选项。


三、固定波长模式(Fixed)

3.1 模式简介

固定波长模式用于在一个或多个预设波长下,测定样品的吸光度或透射率。此模式适用于常规的定量分析,如核酸、蛋白质浓度测定等。

3.2 操作步骤

  1. 选择波长:在软件界面中输入所需的测量波长

  2. 设置参数:选择测量类型(吸光度、透射率等)、光谱带宽、扫描速度等。

  3. 测量样品:将样品放置于比色皿中,点击“开始测量”按钮。

  4. 结果记录:系统自动记录测量结果,并生成数据报告。

3.3 应用场景

  • 核酸浓度测定(260 nm)

  • 蛋白质浓度测定(280 nm)

  • 药物含量分析

  • 环境水质监测


四、扫描模式(Scan)

4.1 模式简介

扫描模式用于在设定的波长范围内,连续扫描样品的吸光度或透射率,生成完整的光谱图。此模式适用于样品的光谱特征分析,如吸收峰位置、带宽等参数的确定。

4.2 操作步骤

  1. 设置波长范围:输入起始波长和终止波长。

  2. 选择数据间隔:设定扫描步长(如 1 nm、0.5 nm 等)。

  3. 选择扫描方向:可选择从低波长到高波长(升序)或反向扫描(降序)。

  4. 启动扫描:点击“开始扫描”按钮,系统自动完成扫描并生成光谱图。

4.3 应用场景

  • 吸收峰位置的确定

  • 光谱带宽的测定

  • 样品的定性分析

  • 多组分样品的分析


五、定量分析模式(Quant)

5.1 模式简介

定量分析模式用于通过建立标准曲线,测定未知样品的浓度。用户需提供至少一个标准溶液的已知浓度和对应的吸光度值,系统根据朗伯-比尔定律计算未知样品的浓度。

5.2 操作步骤

  1. 输入标准数据:在软件中输入标准溶液的浓度和对应的吸光度值。

  2. 选择拟合方法:可选择线性拟合、对数拟合、指数拟合等。

  3. 测量样品:按照固定波长模式或扫描模式测量未知样品的吸光度。

  4. 计算浓度:系统根据标准曲线计算样品的浓度,并生成报告。

5.3 应用场景

  • 药物原料和制剂的含量测定

  • 环境样品中污染物浓度分析

  • 食品中添加剂或色素的定量分析


六、动力学测量模式(Kinetics)

6.1 模式简介

动力学测量模式用于实时监测样品在一定时间内的吸光度变化,适用于酶促反应、化学反应等过程的动力学研究。

6.2 操作步骤

  1. 设置时间间隔:输入数据采集的时间间隔(如每秒、每分钟等)。

  2. 设定总时间:输入总的测量时间。

  3. 选择波长:输入用于监测反应的波长。

  4. 启动测量:点击“开始测量”按钮,系统实时记录数据并生成反应曲线。

6.3 应用场景

  • 酶动力学研究

  • 化学反应速率测定

  • 生物反应过程监控


七、实时显示模式(Live Display)

7.1 模式简介

实时显示模式用于快速获取样品的吸光度或透射率数据,适用于快速筛选或初步分析。

7.2 操作步骤

  1. 选择测量类型:选择吸光度或透射率。

  2. 设定波长:输入所需的测量波长。

  3. 启动实时显示:点击“开始显示”按钮,系统实时显示数据变化。

7.3 应用场景

  • 样品的快速筛选

  • 初步的质量控制检测

  • 教学演示和实验演练


八、模式选择与实验设计建议

实验需求推荐测量模式说明
核酸浓度测定固定波长模式260 nm 波长测定
蛋白质浓度测定固定波长模式280 nm 波长测定
光谱特征分析扫描模式获取完整的吸收光谱
样品浓度定量分析定量分析模式建立标准曲线进行浓度计算
反应动力学研究动力学测量模式实时监测反应过程中的吸光度变化
快速数据获取实时显示模式实时显示样品的吸光度或透射率变化