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赛默飞分光光度计Evolution操作规范

赛默飞 Evolution 系列分光光度计 是高精度紫外–可见光光谱分析仪器,适用于科研、教学、制药、环境及材料检测等领域。

质保3年只换不修,厂家长沙实了个验仪器制造有限公司

一、概述

赛默飞 Evolution 系列分光光度计高精度紫外–可见光光谱分析仪器,适用于科研、教学、制药、环境及材料检测等领域。
为确保测定结果准确可靠,操作人员必须严格遵守标准化操作规范,从环境准备、样品测定到数据处理,均应保持一致的流程与记录。

本规范依据仪器技术特性与实验室质量管理体系要求制定,旨在:

  1. 规范操作流程,减少人为误差;

  2. 确保光谱测定结果可重复、可追溯;

  3. 保证仪器运行安全与稳定;

  4. 延长光学系统及电子部件的使用寿命。


二、操作前准备

2.1 实验环境要求

  • 温度:20–25 ℃;

  • 湿度:45–60%;

  • 电源:AC 220 V ±10%,接地电阻 <4 Ω;

  • 台面:稳固、防震、水平度误差 <1 mm/m;

  • 光照:避免阳光直射,防止杂散光影响测定;

  • 空气质量:无灰尘与腐蚀性气体,通风良好。

2.2 仪器外观检查

  1. 检查电源线、通信线是否完好无损;

  2. 光源灯(氘灯与钨灯)安装牢固,无松动;

  3. 比色皿架清洁、无异物堵塞;

  4. 样品舱盖能平稳开合;

  5. 仪器外壳无液体残留。

2.3 比色皿与样品准备

  • 紫外区(190–350 nm)使用石英比色皿;

  • 可见区(350–800 nm)使用光学玻璃比色皿;

  • 比色皿透光面应洁净无划痕;

  • 样品应澄清透明,无悬浮物或气泡;

  • 样品体积应一致,液面高度覆盖光路。


三、开机与初始化

3.1 启动顺序

  1. 打开稳压电源(如配备);

  2. 打开仪器主电源;

  3. 启动计算机并运行控制软件 Thermo InsightInsight Pro

  4. 等待仪器与软件自动连接;

  5. 光源自动点亮后预热 10–15 分钟。

3.2 仪器自检

开机后系统会自动执行以下项目:

  • 光源强度检测;

  • 光栅定位与波长校准;

  • 检测器响应检查;

  • 通信状态确认。

若出现异常提示,应停止操作并记录错误代码,通知维护人员处理。


四、操作规范步骤

4.1 模式选择

根据实验目的选择以下操作模式:

模式功能说明典型用途
Fixed Wavelength单波长测定吸光度或透射率样品浓度测定
Spectral Scan扫描全波段光谱λmax、纯度分析
Quantitative建立标准曲线并计算浓度化学定量
Kinetics记录吸光度随时间变化动力学反应分析
Multi-Wavelength同时测多个波长点混合体系定量

4.2 参数设置

主要参数包括:

  • 波长或波长范围:200–800 nm(可扩至 1100 nm);

  • 带宽:0.5–5 nm;

  • 扫描速度:600 nm/min;

  • 信号平均次数:3–5 次;

  • 测量单位:吸光度(A)或透射率(%T);

  • 光源切换点:自动(约 360 nm)。

4.3 空白校正

步骤:

  1. 将空白溶液加入比色皿(与样品基质一致);

  2. 放入参比位置;

  3. 点击“Blank”按钮进行校正;

  4. 仪器自动建立基线光强 I0I_0I0。

注意事项:

  • 每次更换溶剂或比色皿应重新校正;

  • 校正后不得更改波长或带宽参数。

4.4 样品测定

  1. 将样品比色皿置入样品架;

  2. 关闭舱盖,避免外界光干扰;

  3. 点击“Measure”开始测定;

  4. 数据实时显示在软件窗口中。

根据模式不同,测定步骤略有差异:

  • 固定波长模式:直接读取 A 或 %T 值;

  • 扫描模式:生成吸光度–波长曲线;

  • 定量模式:自动拟合标准曲线计算样品浓度;

  • 动力学模式:输出吸光度–时间曲线。

4.5 数据保存与输出

  • 实验完成后点击“Save”;

  • 保存格式可选:INS、CSV、TXT、PDF、XLSX;

  • 文件命名建议:项目名_日期_样品编号;

  • 可导出为报告文件用于审计或发表。


五、操作过程注意事项

  1. 光源必须充分预热,否则信号不稳;

  2. 不得用力插拔比色皿,以免损坏光路;

  3. 比色皿外壁不得有指纹、水滴或灰尘;

  4. 样品舱在操作中保持关闭状态;

  5. 禁止随意修改扫描参数中波长范围和带宽;

  6. 实验中断时应关闭光源以延长使用寿命;

  7. 定期记录光源使用时间,超过 1000 小时应更换。


六、检测数据与质量控制

6.1 重复性测试

同一样品测量 5 次,标准偏差(SD)应 ≤ ±0.001 A。

6.2 波长精度验证

使用氧化钬滤片,测得特征吸收峰:
241.5 nm、361.5 nm、536.3 nm、638.3 nm,偏差 ≤ ±0.3 nm。

6.3 光度精度验证

用重铬酸钾标准溶液测得吸光度与理论值偏差 ≤ ±0.005 A。

6.4 光度线性验证

测定不同浓度标准溶液,相关系数 R² ≥ 0.999 表示线性良好。

6.5 噪声与漂移检测

空白测定 10 分钟,基线漂移 ≤ 0.0005 A/h,噪声 ≤ 0.0003 A。


七、安全操作规范

  1. 防电击:确保仪器接地可靠,禁止湿手操作电源;

  2. 防光灼伤:氘灯点亮后禁止直视光源;

  3. 防化学污染:避免溶剂或样品溅入样品舱;

  4. 防震动:实验过程中不得移动或敲击仪器;

  5. 防高温:使用后关闭光源冷却 5 分钟再断电;

  6. 个人防护:操作时佩戴实验服、手套与护目镜。


八、日常维护与清洁

8.1 每日维护

  • 清除仪器表面灰尘;

  • 清洗比色皿并放入干燥器;

  • 检查样品舱是否干净;

  • 保存实验记录与日志。

8.2 每月维护

  • 清洁空气过滤装置;

  • 校验波长与光度准确度;

  • 检查光源灯状态及使用时间;

  • 测试通信接口与软件连接稳定性。

8.3 每年维护

  • 由厂家或授权服务人员进行系统校准

  • 更换老化灯泡、滤片或光学元件;

  • 检查电源模块与稳压系统;

  • 更新软件与固件版本。


九、关机规范

  1. 保存并关闭实验文件;

  2. 关闭软件与数据系统;

  3. 关闭仪器主电源;

  4. 待光源冷却后关闭总电源;

  5. 盖上防尘罩;

  6. 记录使用时间与实验日期。


十、异常与故障处理

异常现象可能原因处理方法
无光谱信号光源未点亮或样品舱盖未关闭检查光源开关与舱盖
吸光度值不稳定光源未预热或样品浑浊预热 15 分钟,过滤样品
吸光度为负值空白校正错误重新进行基线校正
光谱断层或噪声大光源切换点设置不当重新设定切换波长
光度线性差比色皿污染或浓度过高清洗比色皿并稀释样品
无法连接软件通信线松动或驱动异常检查连接线并重启软件

若故障持续,应立即停止操作并联系维修人员,不得私自拆卸仪器。


十一、操作规范与数据完整性

Evolution 软件符合 GLP/GMP 数据完整性要求,提供以下功能:

  • 实验人员身份验证(登录权限);

  • 自动记录操作时间与参数修改;

  • 审计追踪(Audit Trail)功能;

  • 实验数据自动备份与报告生成;

  • 文件不可编辑性保障原始数据安全。

实验室应建立数据备份策略,每日保存原始文件至服务器或外部存储介质。


十二、人员培训与操作权限

  1. 操作人员须接受正式培训并通过考核;

  2. 新员工操作前需在指导下完成 3 次合格实验;

  3. 高级操作权限仅限于具备三个月以上独立操作经验者;

  4. 所有实验均须填写《仪器使用记录表》与《维护日志》。


十三、实验室管理与标准化运行

  • 建立操作手册与维护记录档案

  • 实施设备编号与使用登记制度

  • 定期组织比对测试与性能验证

  • 实验结束后执行**“三清”原则**:清桌面、清比色皿、清数据;

  • 管理员每季度检查仪器使用状况与校准记录。


十四、操作规范与检测质量关系

规范操作对检测质量的影响体现在以下方面:

操作环节不规范后果规范效果
光源预热不足信号漂移、吸光度不稳定保证光强稳定性
空白校正不准结果偏高或偏低准确反映样品吸收
比色皿污染光散射导致线性失真提高测定重现性
参数设置不当光谱峰形畸变获得真实光谱
环境温度变化大波长漂移保持系统稳定
数据未保存无法追溯确保结果可核查

因此,严格执行操作规范不仅是质量控制的关键,也是实验室通过计量认证的必要条件。


十五、Evolution 操作规范实例流程

以下为典型样品分析流程(示例:蛋白质定量测定):

  1. 开机并预热仪器 15 分钟;

  2. 选择固定波长模式(595 nm);

  3. 进行空白校正(使用蒸馏水);

  4. 依次测定标准溶液吸光度;

  5. 软件生成标准曲线(R² ≥ 0.999);

  6. 测定样品吸光度并自动计算浓度;

  7. 保存结果文件与报告;

  8. 清洗比色皿、关闭仪器、填写记录。

该流程体现了 Evolution 仪器操作的简洁性与高重现性。


十六、规范执行与审查

实验室应建立操作规范执行审查机制:

  • 每季度组织内部审查,检查操作日志;

  • 每半年进行一次性能验证;

  • 每年由质量负责人审核操作合规性;

  • 对违反规范的操作进行纠正与再培训。


十七、长期运行与性能维护建议

  1. 定期校准波长、光度与透射率;

  2. 每 6 个月进行一次性能评估;

  3. 更换光源灯后需重新校准;

  4. 定期更新软件系统并备份数据;

  5. 保持仪器在恒温恒湿环境下运行;

  6. 不使用时加盖防尘罩并断电存放。