赛默飞分光光度计Evolution使用方法
质保3年只换不修,厂家长沙实了个验仪器制造有限公司
一、前言
赛默飞 Evolution 系列分光光度计是目前实验室中广泛应用的高性能紫外—可见光光谱分析仪器之一。
其设计兼顾精度、稳定性与易操作性,适用于生命科学、化学分析、环境监测、制药检测及教学科研等领域。
掌握规范的使用方法不仅能提高实验效率和数据准确性,还能延长仪器寿命、减少误差和维护成本。
本文从仪器启动到数据导出,对 Evolution 系列分光光度计的完整使用过程进行详细阐述。
二、仪器构成与技术特点概述
在学习使用方法前,应了解仪器的基本结构与核心功能模块。
1. 主要组成部分
光源系统:采用氘灯(D₂)与钨卤素灯(W)双光源结构,覆盖 190–1100 nm 波段。
单色器系统:全反射光栅结构,具备高波长分辨率和低杂散光特性。
样品舱:配备标准 10 mm 比色皿架,可选恒温附件或多单元样品架。
检测系统:高灵敏度硅光二极管或光电倍增管检测器,信噪比高。
控制系统:集成 VisionLite/VisionPro 软件,用于数据采集、分析与报告输出。
2. 技术特点
三、使用前的准备工作
1. 环境要求
环境温度 20–25℃,湿度 40%–70%;
仪器放置在稳固、防震、远离直射光的台面上;
保持空气干燥、无腐蚀性气体;
确保电源电压稳定(AC 220V ±10%)。
2. 仪器检查
检查电源线、USB 数据线连接是否牢固;
确认样品舱内部无灰尘或液体残留;
检查氘灯、钨灯是否安装正确;
打开样品舱盖,确认比色皿槽清洁无污迹。
3. 比色皿准备
选用材质适当的比色皿:
紫外区域使用石英比色皿;
可见区域使用光学玻璃比色皿。
检查比色皿透明度,无划痕与指纹;
比色皿方向固定一致(刻线朝向一致);
外壁保持干燥,内壁无气泡。
四、仪器启动与系统初始化
1. 开机步骤
打开电源开关;
等待系统启动自检(包括光源与检测模块);
软件界面显示 “Ready” 状态后方可操作;
光源预热 15–20 分钟,保证输出稳定。
2. 进入操作界面
打开配套软件(VisionLite 或 VisionPro),系统默认进入主菜单界面,显示以下主要功能:
五、测量模式选择与设置
1. 固定波长测量
用于在指定波长下测定样品吸光度或透过率。
操作步骤:
选择 “Fixed Wavelength” 模式;
输入波长值(如 350 nm);
设定单位(A 或 %T);
插入空白比色皿并执行 “Blank” 校正;
插入样品比色皿并点击 “Measure”;
记录吸光度结果。
2. 光谱扫描模式
用于获取样品在特定范围内的吸收光谱。
选择 “Scan” 模式;
设定起止波长(如 200–800 nm);
选择扫描速度与带宽;
执行空白校正;
点击 “Start Scan”,系统自动绘制光谱曲线;
结果可导出或叠加比较。
3. 时间扫描模式
用于动态反应测定(如酶活性或化学反应速率)。
选择 “Kinetics” 模式;
设定波长、时间间隔与总时长;
空白校正后开始测量;
软件实时绘制吸光度随时间变化曲线。
4. 定量分析模式
用于测定样品浓度并生成标准曲线。
选择 “Quantitative” 模式;
测量一系列标准溶液吸光度;
自动生成 A–C 曲线及回归方程;
测量未知样品吸光度,软件自动计算浓度。
5. 多波长测量
适用于样品在多个特征波长下吸收分析。
系统可同时测量多个波长并输出平均吸光度值。
六、样品测量流程
1. 样品准备
溶液应澄清透明,无悬浮颗粒;
吸光度范围应控制在 0.2–1.0 A;
若浓度过高需稀释至适宜范围;
样品与空白使用相同溶剂体系。
2. 测量步骤
打开样品舱盖,放入空白比色皿;
点击 “Blank” 进行基线校正;
取出空白比色皿,换入样品比色皿;
点击 “Measure” 开始测量;
系统自动显示吸光度或透过率数值;
若测多组样品,可使用自动编号功能记录。
3. 数据保存
测量结果自动显示于软件数据表格中;
用户可设置文件命名规则与保存路径;
支持批量保存与导出。
七、数据处理与结果输出
1. 数据分析
系统可自动完成以下分析:
计算平均值与标准偏差;
拟合标准曲线并计算相关系数 R²;
自动生成统计表与趋势图。
2. 报告生成
通过 “Report” 菜单可一键生成完整报告,包括:
仪器编号与操作员信息;
实验日期与样品编号;
测量参数与结果表;
光谱图与标准曲线。
3. 数据导出格式
| 格式 | 用途说明 |
|---|---|
| CSV | 适合 Excel 数据分析 |
| 实验报告归档与打印 | |
| XML | LIMS 系统导入 |
| TXT | 简易文本记录 |
八、结果校验与精度控制
1. 波长校验
使用氧化钬滤光片检测波长准确度;
允许误差范围 ±0.3 nm。
2. 吸光度校验
使用标准吸光片或重铬酸钾标准溶液进行验证;
偏差不应超过 ±0.005A(在 1.0A 范围内)。
3. 重复性测试
同一样品连续测量 10 次,计算标准偏差 σ:
σ≤0.0005Aσ \le 0.0005Aσ≤0.0005A
表示仪器稳定性合格。
九、常见问题与解决措施
| 问题 | 可能原因 | 解决方法 |
|---|---|---|
| 吸光度漂移 | 光源未预热充分 | 预热 15–20 分钟 |
| 基线波动大 | 样品舱污染或温度不稳 | 清洁舱体、保持恒温 |
| 无法识别光源 | 灯泡老化或接触不良 | 更换光源 |
| 吸光度异常高 | 比色皿有气泡 | 轻拍比色皿排泡 |
| 光谱曲线不平滑 | 光源能量不足 | 重新校准能量或更换灯 |
十、维护与保养
1. 日常维护
每次使用后关闭光源并盖防尘罩;
保持样品舱干净、无液体残留;
定期检查风扇与散热孔是否畅通;
每月执行一次基线与波长校准。
2. 光源维护
氘灯寿命约 1500 小时,钨灯约 2000 小时;
更换灯泡后执行 “Lamp Alignment” 校准;
使用原厂配件以确保光谱精度。
3. 清洁规范
禁止用强酸或含氨清洗液清洁光学部件;
使用无水乙醇与无尘布轻擦外表面;
定期检查比色皿透光率。
十一、安全操作规范
避免直视光源,防止紫外辐射损伤眼睛;
使用仪器时保持双手干燥,防止触电;
不得在仪器上方堆放液体或重物;
使用前确认电源接地良好;
若长时间不使用,应拔掉电源插头并存放于干燥处。
十二、实验应用案例
实验任务:测定溶液吸光度与浓度关系
配制不同浓度的重铬酸钾标准溶液;
选择固定波长 350 nm;
执行空白校正;
分别测定各溶液吸光度;
绘制标准曲线:
A=0.016C+0.001,R2=0.9997A = 0.016C + 0.001, \quad R^2 = 0.9997A=0.016C+0.001,R2=0.9997
测量未知样品吸光度并计算浓度。
结果表明,Evolution 系列测量线性好、重复性高,满足定量分析要求。
十三、实验室标准化操作建议
建立统一的命名与存档规范;
每季度进行一次性能验证;
不同操作者应使用个人登录账户;
记录每次操作日志与校准数据;
保持软件与固件版本最新。
十四、数据质量与可追溯性
所有测量数据自动记录时间戳与操作者 ID;
系统日志保存操作历史,满足审计追踪要求;
支持与实验室信息管理系统(LIMS)同步;
具备数据加密与防篡改机制,确保结果可靠。


