质保3年只换不修，厂家长沙实了个验仪器制造有限公司

一、概述

Thermo Scientific Evolution 系列分光光度计是一款高性能紫外–可见光 (UV-Vis) 分光光度分析仪器，具备波长扫描、定量测定、动力学分析等多种功能。为了保证测定结果的准确、可靠和可重复，操作人员应严格按照统一的步骤执行仪器启动、样品测定、数据获取与关闭流程。本文将从环境准备、仪器启动、软件连接、测定流程、数据处理及日常维护完整展开。

二、实验室准备与环境检查

在启动仪器之前，需确保操作环境满足条件：

• 温度：建议 20 ～ 25 ℃，避免大幅波动；

• 湿度：推荐 45% ～ 60%，防止镜面或光学组件结露；

• 电源：AC 220 V ±10%、50/60 Hz，接地良好；避免电压波动或共用高功率设备；

• 振动与光照：仪器应置于无大机械振动、无强烈直射光的台面上；

• 通风与洁净度：样品舱周围避免化学蒸气或粉尘积聚。

此外，在仪器启动前，应清空样品舱、清洁比色皿、准备好空白溶液与样品溶液。清洁比色皿时，应确保透光面干净、无指纹、无水珠。使用石英比色皿以适用于紫外–可见波段。

三、仪器启动与软件连接

3.1 启动仪器

1. 确认仪器后方主电源开关处于“OFF”状态；

2. 连接电源线，按下主机电源开关。仪器将进行初始化自检；

3. 前面板指示灯由闪烁转为稳定常亮，表示初始化完成。
   根据型号（如 Evolution One、Evolution 200/300 系列）预热时间可能不同。某些型号采用氙灯无需长时间预热。

4. 在仪器初始化后，打开配套电脑，启动 Insight 或 Insight Pro 软件（Thermo Scientific 系列软件）。软件界面显示设备状态为“已连接”或绿色勾号。 

3.2 软件初始化

1. 在软件界面选择 “Classic” 视图或默认界面；“应用程序”按钮将提供 Fixed（固定波长）、Scan（扫描）、Quant（定量）、Kinetics（动力学）等模式。

2. 若配备自动识别配件（如比色皿架、自动进样器等），置放配件后软件会自动识别并初始化。

3. 确认软件设置参数（如波长带宽、积分时间、光程等）并可保存为方法模板以便重复测定。

四、空白校正与比色皿检查

在正式测定前必须进行空白校正，以消除溶剂、容器和仪器光路背景影响。

1. 准备空白液（通常为样品溶剂或反应体系中不含分析物部分）；

2. 将空白液注入比色皿，插入样品架。确保比色皿放置方向一致、外壁干净无水痕；

3. 在软件中选择“Blank”或“校正空白”功能。仪器将自动测定并设定背景为 0 吸光度或 100 %透射率；

4. 校正完成后，确认软件显示“空白校正完成”信息，方可进行样品测定。

同时检查比色皿状态：确保无划痕、无污点、无气泡，透光面清洁。若发现问题，应及时更换或清洗。

五、样品测定流程

下面以常见的固定波长测定、扫描测定和定量测定三种模式为范例，详述操作步骤。

5.1 固定波长测定（Fixed Mode）

适用于单波长吸光度或透射率测定。

1. 在软件中选择 Fixed 模式；

2. 设置测定波长（如 260 nm 用于核酸、595 nm 用于蛋白比色等），确认光程（如 10 mm）与积分时间；

3. 执行空白校正；

4. 放入样品比色皿，关闭样品舱盖；

5. 点击“Measure”或“测定”按钮；

6. 仪器显示该样品的吸光度或透射率；

7. 若进行多样测定，按次序更换比色皿并记录结果；

8. 完成后点击“Save”保存结果，输入样品编号、操作人员等信息。

5.2 波长扫描测定（Scan Mode）

适用于测定样品吸收光谱、确定 λmax 等。

1. 在软件选择 Scan 模式；

2. 设定起始波长、终止波长（例如 200 至 800 nm）、步长（如 1 nm）、带宽（如 1.0 nm）；

3. 空白校正完成后插入样品比色皿；

4. 点击“Start Scan”；软件自动扫描并绘制吸光度-波长曲线；

5. 扫描结束后，软件自动标出最大吸收峰 (λmax) 及其吸光度；

6. 根据需要保存光谱图、导出数据和结果。

5.3 定量测定（Quant Mode）

用于构建标准曲线并测定未知样品浓度。

1. 在软件选择 Quant 模式；

2. 设置方法：选择系数法或多点标准曲线法；输入标准溶液浓度及对应吸光度或建立多个标准点；

3. 软件拟合标准曲线，计算方程如 $A=aC+b$，显示相关系数 R²；

4. 空白校正完成后测定未知样品；

5. 软件根据方程计算样品浓度，考虑稀释倍数后给出最终浓度值；

6. 保存结果，导出报告，打印表格或曲线图。

六、样品测定注意事项与优化建议

• 确保样品浓度在仪器线性响应范围内（通常吸光度在 0.1-1.0 之间最佳）；超过 2.0 A 时应稀释样品或使用短光程皿；

• 样品应澄清透明，无悬浮颗粒与气泡；如有气泡应轻敲比色皿或超声除泡；

• 比色皿应预热（如为温度敏感样品）以避免温差影响；

• 每批测定最好插入标准样或质控样本以监控仪器性能；

• 测定结束，建议做多次重复测定（一般三次）以计算平均值与标准偏差，评估数据稳定性。

七、数据保存、导出与报告

7.1 数据保存

• 测定结束后点击“Save”或保存按钮；

• 建议命名规则例如：样品编号_日期_模式 (如 “S1_20251029_Fixed”)；

• 可保存至仪器内存或导出至 USB 存储设备。

7.2 数据导出

• 支持格式包括 CSV、TXT、PDF、Excel 等；

• 光谱扫描结果可导出为数据表与图形文件；

• 若需后续图表处理，可导出至 Excel 或 Origin 等软件。

7.3 报告生成

• 软件可自动生成测定报告，包含：样品编号、测定模式、波长／光程／积分时间、吸光度／浓度、标准曲线方程、R² 值、操作人、日期；

• 打印版本可用于纸质归档；

• 建议将电子报告与纸质报告双重保存。

Eight、仪器关闭与日常维护

8.1 关机流程

1. 退出软件测定界面，关闭测定模式；

2. 在软件中选择关闭或断开仪器连接；

3. 关闭仪器主机电源开关；

4. 拔下电源线与外围连接（如 USB、打印机等）；

5. 盖上防尘罩，保持样品舱门关闭。

8.2 日常维护

• 每次使用后用无绒纸沾乙醇轻擦比色皿架内外侧，保持透光窗清洁；

• 保持样品舱干燥，防止蒸气或溶剂残留；

• 定期（如每月）清洁外壳和通风孔，防止灰尘积聚；

• 光源（如氙灯或氘灯）达到使用寿命或发现性能衰减（基线漂移增大、噪声变高）时应及时更换；

• 每半年或按实验室质量管理制度进行一次波长与光度校准以及性能验证。

8.3 校准与验证

• 仪器提供内置校准功能（如氙灯或汞灯校准）以校正波长准确度。 

• 使用标准滤光片或标准溶液验证光度准确度、重复性、基线漂移。

• 建议实验室建立校准与维护记录档案，以符合质量管理或认证要求。

九、操作流程总结

综上所述，一个完整的操作流程可总结如下：

1. 实验环境检查（温度、湿度、电源、振动、洁净度）

2. 仪器启动与软件连接

3. 空白校正与比色皿检查

4. 模式选择与参数设置（固定波长／扫描／定量）

5. 样品测定（包括多次重复、标准样插入）

6. 数据保存、导出与报告生成

7. 仪器关闭、日常维护、校准验证

遵循这一流程，可保证测定结果的准确、稳定、可重复。

十、常见问题与排查提示

• 问题：仪器无法初始化或指示灯不常亮。
  排查：检查电源线、插座接地、软件连接；重启仪器。

• 问题：吸光度波动大或基线不稳。
  排查：样品有气泡、比色皿污染、光源老化、环境温差大。

• 问题：波长峰位偏移。
  排查：校准超期、光栅微移、样品习惯波长设定错误。

• 问题：测定结果偏离预期浓度。
  排查：浓度超线性范围、未做稀释、比色皿光程误设。

• 问题：软件无法识别仪器。
  排查：检查 USB 连接、驱动安装、软件版本兼容性。