赛默飞分光光度计Evolution使用说明
质保3年只换不修,厂家长沙实了个验仪器制造有限公司
一、概述
赛默飞(Thermo Fisher Scientific)旗下的 Evolution 系列分光光度计 是一款高性能紫外—可见光光谱分析仪器,适用于科研、教学、药品检测、环境监测、食品安全及生化分析等多领域应用。
该系列产品以高精度光学系统、智能化软件控制及模块化配件体系著称,能够在 190–1100 nm 的波长范围内实现快速、准确的吸光度、透过率及浓度测定。
Evolution 系列包括多个型号,如 Evolution 201、220、350、600、300 UV-Vis 等,不同型号在光路结构、检测器配置与数据接口方面略有差异,但操作逻辑与功能设计高度一致。本文将以通用方式详细说明其使用步骤、操作要点及系统维护方法。
二、仪器结构与工作原理
1. 光学系统
Evolution 系列采用 双光源单光束或双光束光路结构,由以下主要部件组成:
光源系统:氘灯用于紫外区(190–350 nm),钨卤素灯用于可见区(350–1100 nm);
单色器系统:配备高精度光栅,可实现 ±0.1 nm 波长分辨率;
样品舱:可容纳标准比色皿、流通池、微量样品架或温控附件;
检测器系统:采用硅光二极管或光电倍增管检测器,响应灵敏、噪声低;
电子控制系统:负责波长驱动、信号采集及光源自动切换;
软件系统:提供用户交互界面、数据处理与图谱分析功能。
2. 工作原理
仪器通过控制光栅选择特定波长的单色光照射样品。
光束穿过样品后,透射光强度 III 与入射光强度 I0I_0I0 的比值定义为透过率 TTT:
T=II0T = \frac{I}{I_0}T=I0I
吸光度由公式 A=−log10TA = -\log_{10} TA=−log10T 计算得到。
根据朗伯–比尔定律,吸光度与溶液浓度 CCC 呈线性关系:
A=εbCA = ε b CA=εbC
其中 εεε 为摩尔吸光系数,bbb 为光程长度(cm)。
因此,通过测量吸光度即可实现物质浓度或纯度的定量分析。
三、开机与初始化
1. 环境要求
温度:20–25℃;
相对湿度:40%–70%;
电源:AC 220V ±10%,50Hz;
仪器应放置于平稳、防震、无强光直射的实验台上;
避免高功率设备共线使用,防止电磁干扰。
2. 开机流程
检查电源线和数据线连接是否牢固;
打开主机电源,仪器进入自检程序;
系统检测光源、电路及波长定位;
光源自动点亮,进入预热状态(约 15–20 分钟);
自检完成后,主界面显示“Ready”状态。
3. 光源预热
氘灯与钨灯在预热期间能量逐渐稳定。光源稳定性对测量精度影响显著,实验前必须等待预热完成。
四、测量模式与操作流程
Evolution 系列内置多种测量模式,可通过主界面选择进入。以下为主要模式及操作方法。
1. 固定波长测定
用途:测定样品在指定波长下的吸光度或透过率。
操作步骤:
选择“Fixed Wavelength”模式;
输入波长(如 280 nm);
选择测量单位(A 或 %T);
放入空白比色皿并执行“Blank”校正;
插入样品比色皿并点击“Measure”;
结果实时显示并可保存至内存或 U 盘。
2. 波长扫描模式
用途:扫描一定波长范围内样品的吸收光谱,用于确定特征吸收峰。
操作流程:
选择“Scan Mode”;
输入起始波长与终止波长(如 200–800 nm);
设定扫描步长与速度(Fast/Medium/Slow);
执行空白扫描;
放入样品后点击“Start”;
系统自动绘制光谱曲线并标注 λmax。
3. 定量分析模式
用途:根据标准曲线测定未知样品浓度。
操作流程:
进入“Quantitative Mode”;
输入测量波长(如 350 nm);
测定一系列标准溶液的吸光度;
系统自动绘制标准曲线并计算方程 A=kC+bA = kC + bA=kC+b;
测量未知样品并输出浓度结果。
4. 时间扫描模式
用途:研究吸光度随时间的变化,用于酶动力学或反应速率测定。
操作步骤:
选择“Kinetics”模式;
设定波长、时间间隔与测量总时长;
执行空白校正;
点击“Start”开始连续测定;
系统自动绘制吸光度—时间曲线,可导出数据计算速率常数。
5. 多波长测量模式
用途:同时在多个波长下测量吸光度,适用于多组分混合分析。
操作步骤:
选择“Multi-Wavelength”模式;
输入多个波长(最多 10 个);
完成空白校正;
测量样品并自动计算各波长吸光度值。
6. DNA/Protein 模式
用途:测定核酸或蛋白质浓度及纯度。
操作流程:
进入“Nucleic Acid/Protein”模式;
系统自动设置波长 230、260、280 nm;
测量样品吸光度;
自动计算核酸浓度与纯度(A260/A280 比值)。
五、数据处理与报告输出
1. 数据统计
系统自动计算:
平均值与标准偏差(SD);
吸光度差值 ΔA;
样品浓度平均值与标准曲线相关系数(R²)。
2. 图谱分析
可放大、平滑、积分与标注峰位;
支持光谱叠加比较与差谱分析;
可输出图形文件(PNG、BMP、PDF)。
3. 数据导出
内部存储:可保存 1000 组数据;
外部存储:通过 USB 导出为 CSV、TXT、PDF;
网络共享:部分型号支持 LAN 与云端同步。
4. 报告生成
仪器内置报告模板,包含:
样品编号与参数设定;
吸光度、浓度及曲线数据;
操作员与时间记录;
校准状态与系统信息。
报告可直接打印或保存电子版,符合实验室数据完整性要求。
六、系统校准与性能验证
1. 波长校准
使用氧化钬滤光片或稀土玻璃滤片检测标准吸收峰位置,仪器自动校准光栅角度。
波长准确度应保持在 ±0.3 nm 以内。
2. 吸光度校验
使用重铬酸钾标准溶液测定 235 nm、257 nm、313 nm 处的吸光度值。误差应小于 ±0.005 A。
3. 杂散光检测
以 NaNO₂ 溶液测试,透过率应小于 0.05%T,保证光谱纯度。
4. 稳定性验证
空白扫描 1 小时,基线漂移应低于 ±0.0003 A/h。若超限需重新校正或更换光源。
七、维护与保养
1. 日常维护
每次测定后清洁样品舱及比色皿;
定期擦拭光学窗口,避免污染;
关闭光源前需冷却 10 分钟;
使用防尘罩覆盖仪器。
2. 光源维护
| 光源类型 | 使用寿命 | 建议更换周期 |
|---|---|---|
| 氘灯 | 1000–1500 小时 | 每 12 个月 |
| 钨卤素灯 | 2000 小时 | 每 18 个月 |
更换步骤:
关闭电源并冷却;
打开光源舱盖,拔出旧灯;
安装新灯后执行“Lamp Calibration”;
检查光源能量输出。
3. 比色皿与样品舱保养
使用后立即清洗并擦干;
比色皿存放于专用盒内防止划伤;
避免腐蚀性试剂溅入样品舱。
4. 软件与系统更新
通过 USB 或网络接口更新软件版本;更新前须备份所有数据。
更新完成后重新执行波长与吸光度校准。
八、常见故障与排查
| 故障现象 | 可能原因 | 处理方法 |
|---|---|---|
| 无法启动 | 电源线松动或保险丝熔断 | 检查电源、替换保险丝 |
| 吸光度波动大 | 光源未预热或样品含气泡 | 预热光源、重新取样 |
| 光谱曲线畸变 | 光路污染或光栅偏移 | 清洁光学元件、重新校准 |
| 无法保存数据 | 内存满或 U 盘损坏 | 删除旧文件、更换 U 盘 |
| 显示器无响应 | 系统死机或电源不稳 | 重启仪器、检查供电 |
如出现无法排除的故障,应联系授权售后服务工程师进行维修。
九、安全操作注意事项
禁止在光源点亮时打开光学舱门,以防紫外辐射;
液体样品操作需防止溅入仪器内部;
清洁仪器时禁止使用含氨溶液或强碱试剂;
定期检查接地装置,防止电击风险;
非专业人员不得拆卸内部电路。
十、应用领域
1. 生命科学
2. 化学分析
有机化合物特征光谱研究;
络合物比色分析;
化学反应速率测定。
3. 医药与食品检测
药物溶液含量测定;
食品添加剂、色素及维生素分析。
4. 环境监测
水质中氨氮、硝酸盐、磷酸盐定量;
工业废水中金属离子检测。
十一、技术性能指标概览
| 指标项目 | 技术参数 |
|---|---|
| 波长范围 | 190–1100 nm |
| 波长准确度 | ±0.3 nm |
| 波长重复性 | ±0.1 nm |
| 吸光度范围 | -0.3–3.5 A |
| 吸光度准确度 | ±0.002 A |
| 光谱带宽 | 1 nm(可选 2 nm) |
| 基线稳定性 | ≤0.0003 A/h |
| 光源系统 | 氘灯 + 钨卤素灯 |
| 检测器 | 硅光二极管或 PMT |
| 显示屏 | 7 英寸触控液晶屏 |
| 数据接口 | USB / LAN / Wi-Fi |
十二、长期保存与停机管理
长期停用前关闭光源并断电;
清洁样品舱、光窗与比色皿;
存放于干燥、无尘、温度适中的环境;
每月通电一次,保持电子系统活性;
若重新启用,应重新校准波长与吸光度。


