赛默飞分光光度计BioMate光学系统
BioMate 采用先进的双光束光路设计、全息光栅分光系统和高灵敏检测模块,在保证高稳定性的同时,实现了宽波段、高准确度的光谱测量。
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一、概述
赛默飞(Thermo Scientific)BioMate 系列分光光度计是一类高性能紫外–可见光分析仪器,其核心在于精密的光学系统。
光学系统是仪器的“视觉中枢”,它决定了波长分辨率、吸光度精度、杂散光水平和信噪比等关键指标。
BioMate 采用先进的双光束光路设计、全息光栅分光系统和高灵敏检测模块,在保证高稳定性的同时,实现了宽波段、高准确度的光谱测量。
要充分理解 BioMate 的性能优势,必须从其光学系统的结构组成、工作机理与工程优化角度进行系统性分析。
二、光学系统的总体构成
BioMate 分光光度计的光学系统由五个主要部分组成:
光源模块(Light Source)
入射与准直系统(Entrance & Collimation)
分光系统(Monochromator)
样品与参比通道(Sample/Reference Beam Path)
检测器模块(Detector System)
此外,电子信号处理与反馈控制系统与光学模块协同运行,实现光强稳定与波长精确控制。
三、光源系统
3.1 光源类型
BioMate 依据型号不同,采用以下光源配置:
氙灯(Xenon Lamp):单灯系统,覆盖 190–1100 nm,光谱连续、能量稳定,点亮即用;
氘灯(Deuterium Lamp)+ 钨灯(Tungsten Lamp):双灯系统,分别用于紫外与可见光区,波段切换自动完成。
3.2 光源特性
氘灯:在 190–350 nm 区域发射连续谱,紫外强度高、稳定性好。
钨灯:发射范围 350–1100 nm,适合可见与近红外测定。
氙灯系统:无需切换,寿命长达 2000–5000 小时,热量低,噪声小。
3.3 光源设计优势
BioMate 的光源安装于独立密封腔体内,防尘防潮;
采用恒流稳压供电系统,确保光强输出均匀;
光源光束经透镜聚焦后入射分光腔,保证能量集中与方向稳定。
四、入射与准直系统
光源发出的光线经聚光镜、狭缝与准直透镜组后形成平行光。
此过程的作用包括:
限定光束宽度与方向;
减少散射与反射损失;
提高光线的单色性与能量密度。
4.1 入射狭缝
入射狭缝宽度一般为 0.5–2.0 mm,可调节光谱分辨率与光强。
狭缝越窄,分辨率越高但光强降低;
狭缝越宽,光通量增加但分辨率下降。
BioMate 通过步进电机微控狭缝宽度,在不同测定模式下自动优化光通量。
4.2 准直镜组
采用镀铝或增强反射膜反射镜,反射率超过 90%。
镜面经精密镀膜处理,抗氧化性能优良,可长期保持反射效率。
五、分光系统
分光系统是光学核心,用于将复合光分解为单色光。BioMate 使用**全息光栅单色器(Holographic Grating Monochromator)**结构。
5.1 光栅原理
光栅通过规则刻线对入射光进行衍射,使不同波长的光以不同角度反射,从而实现波长分离。
BioMate 光栅刻线密度一般为 1200–1800 线/mm。
其反射式全息光栅刻线由激光干涉技术制成,表面无机械划痕,杂散光极低。
5.2 波长扫描机制
波长选择通过步进电机精密控制光栅旋转角度完成:
λ=2dsinθ\lambda = 2d \sin \thetaλ=2dsinθ
其中,d 为刻线间距,θ 为衍射角。
角度变化引起波长变化,实现连续扫描。
5.3 光栅控制精度
步进分辨率可达 0.01 nm;
波长重复性优于 ±0.1 nm;
机械驱动系统采用反馈编码器,防止漂移。
5.4 双光束结构中的分光
分光后的一部分光线进入样品通道,另一部分进入参比通道。
双通道同步检测大幅提升基线稳定性,消除光源波动和电子噪声影响。
六、光路结构与双光束原理
BioMate 采用双光束(Double Beam)光学系统。
6.1 单光束与双光束对比
单光束:一次仅测样品光路,空白与样品需分开测定;
双光束:样品与参比同时测量,信号比值反映吸光度,实时抵消光强波动。
6.2 光路结构
光束经分光镜分成两路:
一路经样品池(Sample Beam);
另一路经参比池(Reference Beam)。
两束光通过不同路径后同时到达检测器,电子系统实时计算比值:
A=log10(I0I)A = \log_{10} \left( \frac{I_0}{I} \right)A=log10(II0)
其中 I0I_0I0 为参比光强,III 为样品光强。
6.3 优势
减少外界干扰;
改善信噪比;
长时间扫描时保持基线稳定;
实现多波长与连续动力学分析。
七、样品室与光通路径
7.1 样品舱结构
样品舱为光路中间环节,用于放置比色皿。
BioMate 样品舱具有以下特点:
模块化设计,可更换单比色皿架、多池位架或温控池;
光学窗材质为石英玻璃,透光范围 190–1100 nm;
内壁采用黑色防反射涂层,减少杂散光。
7.2 比色皿与光程
标准光程为 10 mm,也可选用 5 mm、20 mm 等规格。
光束从比色皿前窗入射,穿过样品后到达检测器,透射光强反映样品吸收程度。
7.3 自动池位切换
部分型号配有自动旋转比色皿架,支持多样品连续测定,系统可自动识别位置并记录编号。
八、检测器系统
8.1 检测器类型
BioMate 主要使用以下检测器:
硅光二极管(Silicon Photodiode):响应速度快、稳定性高;
光电倍增管(PMT)(高端型号):灵敏度更高,适合低浓度检测。
8.2 工作原理
当光线照射检测器表面时,产生光电流信号,其强度与入射光成正比。
信号经放大、模数转换(A/D)后输入主控单元,由软件计算吸光度或浓度。
8.3 性能指标
光度范围:0–3 A(部分型号可达 4 A);
噪声水平:≤0.0003 A;
稳定性漂移:≤0.001 A/h。
九、电子与反馈控制系统
光学系统与电子控制系统协同工作。
光源电流、光栅位置、检测器信号均由中央处理器实时监控。
9.1 自动优化功能
Auto-Balance:自动平衡样品光束与参比光束强度;
Auto-Gain:自动调整检测器放大倍数,确保信号在线性范围内;
Auto-Lamp Control:自动判断光源状态并执行切换或亮度补偿。
9.2 校准与稳定控制
系统内置波长与光度标准程序,可定期校正光学参数;
光源电流、环境温度、信号漂移均由算法自动补偿。
十、光学性能指标
| 参数项目 | 典型值 |
|---|---|
| 波长范围 | 190–1100 nm |
| 波长准确度 | ±0.3 nm |
| 波长重复性 | ±0.1 nm |
| 光度准确度 | ±0.003 A(0–1 A) |
| 光度重复性 | ±0.001 A |
| 基线漂移 | ≤0.001 A/h |
| 杂散光 | ≤0.05%(220 nm) |
| 带宽 | 1–5 nm 可调 |
| 噪声水平 | ≤0.0003 A |
这些指标综合反映了 BioMate 光学系统的高灵敏度与长期稳定性。
十一、光学系统的影响因素
11.1 光源老化
随着使用时间增加,灯丝衰减导致光强降低,应定期检测与更换。
11.2 光学元件污染
镜面、狭缝或光窗的污迹会造成散射光增加,需保持清洁。
11.3 光路偏移
由于震动或机械应力,光学元件位置偏移会引起信号不对称或波长误差。
11.4 环境条件
温湿度波动会导致光学材料膨胀收缩,引起微小漂移。
建议保持恒温恒湿环境。
十二、光学系统维护与校准
12.1 日常维护
每次测定后关闭光源,减少老化;
定期清洁样品舱与光学窗;
禁止用手直接触摸镜片或光栅表面。
12.2 校准流程
使用钕玻璃或钬氧化物滤光片检测波长准确度;
使用标准中性密度滤片验证光度准确度;
执行系统内置的“Wavelength Calibration”与“Photometric Calibration”;
记录校准日期与结果。
12.3 预防性维护
每 6 个月检查光源输出;
每年进行一次光学对准;
若环境湿度高,建议使用干燥剂防潮。
十三、BioMate 光学系统的技术优势
全光谱覆盖:单灯系统实现 190–1100 nm 宽波段检测。
低杂散光设计:全息光栅与防反射通道减少背景干扰。
高分辨率控制:步进电机与反馈编码器确保波长精度。
双光束补偿:实时修正光强波动与电子噪声。
自动化算法:光源平衡、信号放大与基线调整均智能完成。
紧凑模块化结构:光学元件布局紧密,抗震性强。
这些设计使 BioMate 在日常定量检测、动力学实验、光谱分析及生物样品测定中表现出优异的可靠性。
十四、典型应用实例
14.1 核酸与蛋白质分析
高精度紫外区光学系统保证 A260/A280 比值的准确测定,可精确计算核酸纯度与浓度。
14.2 化学比色反应
在可见光区(400–700 nm),光谱稳定性确保显色反应的线性检测。
14.3 酶动力学与反应监测
光通量高、信噪比优,适合微量酶活性测定及反应速率曲线绘制。
14.4 材料吸收特性研究
光谱分辨率高,能准确描绘溶液或薄膜的吸收峰形态。
十五、未来优化方向
随着光电子技术的发展,BioMate 光学系统仍在持续升级,未来改进方向包括:
引入固态光源(LED 阵列)以延长寿命、降低能耗;
使用非球面透镜与低色散玻璃提高聚焦性能;
应用智能自校正算法实现实时波长漂移补偿;
通过光纤传输技术实现远程采样与微量检测。
这些创新将进一步提升光学系统的智能化与灵敏度,使分光光度技术向更高层次发展。


