赛默飞分光光度计BioMate操作步骤
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一、设备概述
赛默飞(Thermo Fisher Scientific)BioMate 系列分光光度计是一类高精度紫外-可见光(UV-Vis)分析仪器,广泛应用于分子生物学、化学分析、环境监测、药物检测等领域。该设备通过测定样品对特定波长光的吸收程度,推算出物质浓度、纯度或反应动力学等信息。
BioMate 分光光度计具有光源稳定、检测范围宽、操作简便、支持多种检测模式(如DNA/RNA浓度测定、蛋白质分析、动力学测定等)等优点,适合科研实验室及教学用途。
二、仪器主要组成与功能简介
光学系统
光源一般包括氘灯(用于UV区)和钨灯(用于可见光区)。
光经单色器分离后以特定波长照射样品。
检测器(如硅光二极管)将透射光信号转换为电信号,用于吸光度计算。
样品室与比色皿
样品仓可容纳标准1cm光程的石英或塑料比色皿。
BioMate 配备自动识别样品位置及温控功能(部分型号)。
控制界面
彩色触摸屏,内置多种测定程序。
支持USB数据导出、网络传输及外接打印机。
软件功能
自动波长扫描、时间扫描、浓度计算、DNA/蛋白质浓度换算等。
可保存标准曲线及实验方法,便于重复实验。
三、操作前准备
环境条件
放置在干燥、无尘、避免阳光直射的实验台上。
室温保持20–25°C,相对湿度不超过70%。
设备检查
检查电源线及数据线连接是否牢固。
确保比色皿清洁透明,无气泡或划痕。
光源工作正常(氘灯和钨灯指示灯亮)。
预热
开机后预热10–20分钟,待光源稳定。
进入主界面前系统会自动进行自检和波长校准。
四、基本操作步骤
1. 开机与初始化
打开电源开关,等待自检完成。
屏幕显示主菜单后,选择所需模式(如“波长扫描”“定点测量”“DNA/RNA分析”等)。
若为首次使用,可在“设置”中调整语言、单位、数据保存格式等参数。
2. 空白校准
空白校准是测量前的关键步骤,用于扣除溶剂或比色皿自身吸光。
取空白溶液(通常为缓冲液或蒸馏水),注入比色皿。
将比色皿放入样品室指定位置。
关闭样品盖后,点击“空白”或“Blank”键进行校准。
仪器自动记录透射率并设为基准值。
3. 样品测定
用移液枪吸取样品溶液,装入干净比色皿中。
确保比色皿外壁无液滴或指纹,可用无绒纸擦拭。
放入样品仓,关闭盖子。
在界面选择测定模式:
单波长模式:输入测量波长(如260nm、280nm)。
扫描模式:设定起止波长与扫描间隔。
动力学模式:设定时间间隔与测定周期。
点击“测量”键开始测试。
4. 读取与保存数据
测量完成后,屏幕显示吸光度(A)、透过率(T)或浓度(C)。
可选择保存、打印或导出结果。
若使用标准曲线法,系统自动计算样品浓度。
五、常用测定模式操作详解
1. 波长扫描模式
用于分析化合物的光谱特征。
设置起始波长与终止波长(如200–800 nm)。
设定扫描速度(Slow/Medium/Fast)。
插入样品比色皿并执行空白校准。
点击“开始扫描”,系统绘制吸收光谱曲线。
可在图上标注峰值波长并输出数据。
2. 浓度测定模式
通过标准曲线求得未知样品浓度。
测定一组标准溶液的吸光度,建立浓度—吸光度线性关系。
保存曲线后,输入未知样品吸光度,仪器自动计算浓度。
适用于离子、金属离子或染料类溶液定量分析。
3. DNA/RNA浓度测定
BioMate 内置核酸分析程序,常用于检测样品纯度。
测量波长:260nm 与 280nm。
系统自动计算 A260/A280 比值,用于判断纯度。
A260/A280 ≈ 1.8 表示 DNA 纯度较高;
A260/A280 ≈ 2.0 表示 RNA 较纯。
可显示浓度(ng/μL)并保存结果。
4. 蛋白质测定模式
常见方法包括 Bradford、Lowry 或 Biuret 法。
选择对应测定程序。
通过标准品建立吸光曲线。
系统自动计算样品浓度并生成报告。
5. 动力学测定模式
用于研究反应速率或酶活性。
设定波长与采样时间间隔。
仪器连续记录吸光度变化并绘制曲线。
可自动计算反应速率(ΔA/min)。
六、结果导出与打印
结果可直接保存至USB或内存中,文件格式常为
.csv或.txt。连接打印机可输出测定报告及光谱图。
在PC端使用Thermo Scientific INSIGHT或VISION软件进行数据分析与归档。
七、维护与保养
比色皿清洗
使用蒸馏水或无离子水冲洗后晾干。
避免使用强酸、强碱清洗剂。
光源维护
若灯光闪烁或能量下降,应及时更换氘灯或钨灯。
替换后进行光路校准。
仪器清洁
定期擦拭外壳,避免液体渗入内部。
样品舱保持干燥,防止霉变或腐蚀。
软件更新与备份
定期更新系统程序,确保兼容性。
实验数据及时导出保存,防止丢失。
八、常见故障与排查
| 问题现象 | 可能原因 | 解决方法 |
|---|---|---|
| 吸光度不稳定 | 比色皿有污渍或气泡 | 清洁比色皿,重新装样 |
| 无法校零 | 空白溶液选择错误 | 使用正确缓冲液重新校准 |
| 光谱偏移 | 光源老化或波长校准误差 | 更换光源并重新校正 |
| 屏幕无显示 | 电源接触不良或主板异常 | 检查电源连接,联系售后 |
| 数据异常 | 未完成空白校准 | 重新进行Blank设置 |
九、安全与注意事项
操作时避免用手直接触摸比色皿透光面。
不得用有机溶剂擦拭显示屏或塑料外壳。
禁止在开盖状态下更换光源。
使用后应关闭电源并盖好防尘罩。
十、附录:使用建议与优化技巧
比色皿一致性
同批实验尽量使用同类型、同厂家比色皿,避免因透光率差异造成误差。样品体积与浓度控制
样品体积一般为1 mL 左右,过高浓度需稀释后测量。波长选择原则
分析峰吸收最强处的波长(λmax)。
进行多组分分析时,应选择干扰最小的波长。
重复测定与均值计算
每个样品至少测定2–3次,取平均值作为最终结果,以提高准确性。温度控制
若实验对温度敏感,可配合恒温比色皿或水浴系统,确保测定条件一致。


