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赛默飞洗板机5165040仪器校准

仪器校准的目的在于验证和修正设备在分液体积、吸液速度、液位检测与喷嘴一致性等方面的精度,使设备持续符合出厂性能标准及实验室质量管理体系要求(如 ISO17025 或 GLP)。

质保3年只换不修,厂家长沙实了个验仪器制造有限公司

一、概述

Thermo Scientific Wellwash 5165040 洗板机是一款自动化、智能化的微孔板清洗设备,主要应用于 ELISA、免疫吸附、细胞清洗及生化分析等实验。
其核心功能包括多通道液体分配、精确吸液、残液控制与程序化运行。为了保证实验结果的准确性与可重复性,仪器在使用前及运行过程中必须定期进行校准(Calibration)

仪器校准的目的在于验证和修正设备在分液体积、吸液速度、液位检测与喷嘴一致性等方面的精度,使设备持续符合出厂性能标准及实验室质量管理体系要求(如 ISO17025 或 GLP)。


二、仪器校准的意义

  1. 保证数据准确性
    通过校准确保分配体积精度与吸液残液一致,消除系统误差。

  2. 维持长期稳定性
    校准可修正泵管老化、液路阻力变化或传感器漂移造成的性能偏差。

  3. 提升实验一致性
    不同批次实验可通过标准化校准参数获得统一洗净度。

  4. 符合法规与质量体系
    定期校准是实验室设备管理与认证审核的必要条件。

  5. 降低维护成本
    及时校准能预防重大故障或清洗不良导致的实验失败。


三、校准准备条件

在执行任何校准操作前,必须确保以下条件满足。

1. 环境条件

  • 室温保持在 20–25 ℃;

  • 相对湿度低于 70%;

  • 操作台平整、无振动;

  • 避免强光直射与气流扰动。

2. 仪器状态

  • 电源稳定,接地良好;

  • 液体管路畅通;

  • 喷嘴无堵塞或结晶;

  • 泵管未老化变形。

3. 校准器具

  • 精密量筒(10 mL / 50 mL 各 1);

  • 电子天平(精度 0.1 mg);

  • 96 孔标准板;

  • 去离子水或 PBS 缓冲液;

  • 校准记录表与笔记文档。

4. 清洗与排气

在校准前,需执行一次 Prime(引液) 程序,排除管路空气并确保液体流动连续。


四、校准项目

5165040 仪器的校准主要包括以下六个部分:

  1. 分液体积校准(Dispense Calibration)

  2. 吸液系统校准(Aspirate Calibration)

  3. 液位传感器校准(Level Sensor Calibration)

  4. 喷嘴一致性检测(Nozzle Uniformity Test)

  5. 蠕动泵性能校准(Pump Performance Calibration)

  6. 系统整体验证(System Validation)


五、分液体积校准

分液体积校准用于检测并修正蠕动泵输出体积与设定值的偏差,是最核心的校准环节。

1. 操作步骤

  1. 打开菜单:Tools → Calibration → Dispense

  2. 选择通道(A 或 B);

  3. 设定分液体积(建议 300 µL);

  4. 将量筒置于喷嘴下方;

  5. 执行分液 10 次;

  6. 记录实际体积并计算平均值。

计算公式:

误差(%)=测量体积−设定体积设定体积×100误差(\%) = \frac{测量体积 - 设定体积}{设定体积} \times 100误差(%)=设定体积测量体积−设定体积×100

2. 判定标准

  • 平均误差 ≤ ±5%;

  • 变异系数(CV) ≤ 3%。

若超过标准,系统会提示修正系数,用户可手动输入新的校准值。

3. 调整示例

若设定体积为 300 µL,实测为 285 µL,误差 -5%,则输入校准系数 1.05。
保存后重新测试确认结果合格。


六、吸液系统校准

吸液系统校准用于保证孔底液体能被完全抽取,同时避免吸液过深损伤孔板。

1. 操作步骤

  1. 进入菜单:Tools → Calibration → Aspirate

  2. 将 300 µL 水加入 96 孔板;

  3. 设定吸液高度 1 mm、速度 Medium;

  4. 执行吸液程序 3 次;

  5. 称量板前后重量差计算残液量。

公式:

残液体积=重量差孔数残液体积 = \frac{重量差}{孔数}残液体积=孔数重量差

2. 标准要求

  • 平均残液 ≤ 2 µL/孔;

  • 孔间差异 ≤ 1 µL。

3. 调整方法

若残液超标:

  • 将吸液高度降低至 0.5–0.8 mm;

  • 调整速度为 Slow 或使用 Sweep 模式。


七、液位传感器校准

液位传感器用于监测洗液瓶与废液瓶状态,防止“缺液”或“溢液”。

1. 校准流程

  1. 打开菜单:Tools → Sensor Test

  2. 选择 “Liquid Level Sensor”;

  3. 放置空洗液瓶,应显示 “Empty”;

  4. 缓慢注入液体,液位至 80% 显示 “Full”;

  5. 反复验证报警响应。

2. 标准要求

  • 检测误差 ≤ ±5%;

  • 反应时间 < 2 秒;

  • 无误报或延迟报警现象。

若出现异常,清洁探针后重新测试。


八、喷嘴一致性检测

喷嘴一致性直接影响孔间洗液均匀性。

1. 操作步骤

  1. 在 12 个量筒中分别接取喷液;

  2. 执行分液程序(300 µL × 5 次);

  3. 测量各通道液体体积;

  4. 计算最大与最小体积差异率:

差异率=最大值−最小值平均值×100%差异率 = \frac{最大值 - 最小值}{平均值} \times 100\%差异率=平均值最大值−最小值×100%

2. 判定标准

  • 差异率 ≤ 5%;

  • 若超限,清洗喷嘴或更换洗头。


九、蠕动泵性能校准

蠕动泵为液体传输核心,其输出稳定性决定整体精度。

1. 测试项目

  • 转速稳定性;

  • 输出线性度;

  • 管路密封性;

  • 泵管弹性。

2. 测试步骤

  1. 设置分液体积为 100、200、300、400 µL;

  2. 测量各体积对应的实际输出;

  3. 绘制“体积–转速”线性关系图;

  4. 若相关系数 R² < 0.98,需更换泵管并重测。


十、系统整体验证

在完成各单项校准后,应进行整体性能验证,以确认设备在标准程序下运行稳定。

1. 验证步骤

  1. 执行完整清洗程序(3 次循环);

  2. 观察液体流动与吸排情况;

  3. 测试残液量与喷液均匀性;

  4. 检查系统报警、液位显示是否正常。

2. 验证指标

  • 分液体积偏差 ≤ ±5%;

  • 吸液残液 ≤ 2 µL/孔;

  • 喷液一致性差异 ≤ 5%;

  • 报警系统响应正确。


十一、校准周期与计划

为确保持续稳定性能,建议建立以下校准周期。

校准项目周期说明
分液体积每月使用频繁时每两周一次
吸液系统每月喷头更换后需重新校准
液位传感器每季度清洗探针后复验
喷嘴一致性每季度深度清洗后执行
蠕动泵性能每半年更换泵管后校准
系统验证每年由设备管理员执行

十二、校准记录与追溯

5165040 内置数据存储与导出功能,可将校准数据以电子方式保存。

1. 数据保存

  • 校准完成后点击 “Save Report”;

  • 系统自动记录日期、项目、测量值、误差、操作者等信息;

  • 可通过 USB 导出为 .csv 文件备份。

2. 校准报告应包含

  • 校准日期与设备编号;

  • 校准项目与参数设置;

  • 实测数据与计算结果;

  • 误差修正值;

  • 操作者与审核人签名;

  • 下次校准日期。

该报告应归档保存至少三年,便于质量追溯。


十三、常见校准异常及处理

异常现象原因分析处理措施
分液量偏小泵管老化或气泡存在更换泵管并执行 Prime 排气
残液量偏高吸液高度过高或喷嘴堵塞降低高度,清洗喷嘴
报警延迟液位传感器污损清洁探针并重新校准
校准菜单锁定用户权限不足切换至管理员账户
体积波动大泵轮磨损或管径不均更换泵轮组件
校准无法保存内存已满删除旧日志文件

十四、性能验证与稳定性测试

在仪器完成校准后,应进行性能验证,以确认校准结果的稳定性。

1. 重复性测试

连续执行 10 次分液测量,计算 CV 值应 ≤ 3%。

2. 清洗效果验证

使用含染料的液体(如 1% 蓝色染液)进行洗板,清洗后孔内应无可见残色。

3. 长时间稳定性测试

连续运行 30 个循环,检查体积输出是否稳定、泵温升是否正常。


十五、校准注意事项

  1. 校准时仅使用去离子水或 PBS,不得使用含盐或高粘度溶液;

  2. 校准过程中禁止调整泵管或拔插管路;

  3. 测量体积时保持量筒垂直视线,防止读数误差;

  4. 校准后必须执行 “Rinse” 程序冲洗系统;

  5. 设备移动或维修后应立即重新校准;

  6. 操作者需经过培训并熟悉菜单逻辑。


十六、仪器校准与实验质量关系

精确的仪器校准对实验结果有直接影响:

  • 分液体积误差会导致反应体系浓度不均;

  • 吸液不彻底可能造成信号偏高或背景干扰;

  • 喷嘴不一致会引起孔间数据波动;

  • 液位检测误差可能中断程序,影响实验进度。

因此,建立标准化校准制度是确保 ELISA 检测、抗体筛选、细胞实验结果可靠的根本保障。


十七、质量控制与再确认

  1. 每次校准后,应将结果与上次记录比对;

  2. 若偏差连续超标,应进行系统维护

  3. 校准后应执行一次性能再确认(PQ);

  4. 建议每年委托厂商或第三方进行全面计量校验。