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赛默飞洗板机5165040参数调节

Thermo Scientific Wellwash 5165040 是一款全自动 96 孔板清洗机,广泛应用于 ELISA、免疫吸附、蛋白结合及细胞洗涤实验。

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一、概述

Thermo Scientific Wellwash 5165040 是一款全自动 96 孔板清洗机,广泛应用于 ELISA、免疫吸附、蛋白结合及细胞洗涤实验。
设备通过高精度蠕动泵与智能控制系统实现液体自动分配与吸取,用户可通过参数调节功能自定义洗涤流程,以适应不同实验类型与板型结构。

合理的参数调节不仅能提高清洗效果和重复性,还可降低残液量、减少试剂浪费、延长设备寿命。
本说明详细讲解了 5165040 的各项可调参数、设置方法及优化建议,帮助操作者在实验中实现最佳性能。


二、参数调节的目的

  1. 适配不同实验类型:根据 ELISA、蛋白结合或细胞实验选择不同分液体积、浸泡时间及吸液速度。

  2. 优化清洗质量:通过调整喷液高度与吸液模式提高洗净度、减少交叉污染。

  3. 控制液体体积精度:确保分液量与吸液残液保持在规定误差范围内。

  4. 节省试剂与时间:通过合理设定循环次数和分液体积,提升效率。

  5. 延长泵与管路寿命:在满足清洗要求的前提下降低泵速与压力。


三、参数体系概述

5165040 的参数系统主要分为六个模块:

  1. 液体分配参数(Dispense Parameters)

  2. 浸泡控制参数(Soak Parameters)

  3. 吸液控制参数(Aspirate Parameters)

  4. 循环与延时参数(Cycle/Delay Parameters)

  5. 喷头与板型设置(Head/Plate Settings)

  6. 洗液通道与系统速度参数(Buffer & Speed Settings)

每个模块均可独立调整并存储在程序文件中,实现个性化清洗方案。


四、液体分配参数调节

分液参数直接决定洗液喷入的体积、速度和高度,是影响清洗均匀性和稳定性的关键要素。

1. 分液体积(Volume)

  • 范围:50–400 µL;

  • 精度:±5%;

  • 调节方式:在程序编辑界面选择 “Dispense Volume”;

  • 推荐值:

    • 常规 ELISA 实验:300 µL;

    • 高浓度蛋白样品:350 µL;

    • 快速洗涤:200 µL。

调节原则:体积越大洗净度越高,但洗液消耗增加;体积过小易导致孔底残留。

2. 分液速度(Speed)

  • 选项:Slow / Normal / Fast;

  • 作用:影响液体冲击力和气泡形成;

  • 推荐选择:

    • Slow:适用于含蛋白或泡沫易生样品;

    • Normal:常规 ELISA;

    • Fast:快速预洗或大通量检测。

3. 喷液高度(Height)

  • 范围:1–6 mm(距孔底距离);

  • 调节方法:菜单中“Dispense Height”;

  • 参考设定:

    • 平底板:2 mm;

    • U 底板:3 mm;

    • V 底板:4 mm。

高度过低可能引起溅液;过高则喷射偏移孔中心,降低清洗效果。

4. 分液通道(Buffer Channel)

  • 通道数:A、B 双通道;

  • 可在程序中交替使用;

  • 示例:A 通道为 PBS,B 通道为去离子水。


五、浸泡控制参数调节

浸泡(Soak)是提高清洗彻底性的关键环节,用于溶解未结合物和改善孔间均匀性。

1. 浸泡时间(Soak Time)

  • 范围:0–999 秒;

  • 推荐值:

    • 常规实验:20–30 秒;

    • 高粘度样品:40–60 秒;

    • 预洗模式:10 秒。

时间过短影响洗净度,过长会延误实验节奏。

2. 振荡模式(Shake Mode)

  • 选项:On / Off;

  • 功能:在浸泡期间轻微振动孔板,促进洗液接触;

  • 建议开启场景:蛋白结合实验或细胞板清洗。


六、吸液控制参数调节

吸液阶段的参数影响孔底残液量及清洗后孔的干净程度。

1. 吸液高度(Aspirate Height)

  • 范围:0.5–3 mm;

  • 调节方式:程序中 “Aspirate Height”;

  • 推荐设置:

    • 平底板:0.8 mm;

    • U 底板:1.2 mm;

    • V 底板:1.5 mm。

2. 吸液速度(Aspirate Speed)

  • 选项:Low / Medium / High;

  • 调节原则:

    • Low:减少泡沫生成,适合精密实验;

    • Medium:标准清洗;

    • High:快速排液或大通量操作。

3. 吸液模式(Aspirate Mode)

  • Single(单吸):单点抽液;

  • Dual(双吸):两次抽液,提高干净度;

  • Sweep(扫吸):喷嘴沿孔底移动,残液量最低。

对于 ELISA 实验,推荐使用 Sweep 模式,可将残液控制在 2 µL 以下。


七、循环与延时参数调节

循环次数与延时控制清洗过程的重复与时间间隔。

1. 循环次数(Cycle Count)

  • 范围:1–9 次;

  • 功能:决定分液、浸泡、吸液动作重复次数;

  • 推荐值:

    • 标准 ELISA:3 次;

    • 高蛋白样品:4–5 次;

    • 预清洗:2 次。

2. 延时(Pause/Delay)

  • 范围:0–999 秒;

  • 用途:两步之间的静置时间;

  • 一般设定为 0–5 秒。


八、喷头与板型参数调节

1. 喷头类型(Wash Head Type)

  • 标配:1×12 通道喷头;

  • 可更换为 1×8 通道(选配件)。

  • 调节方式:系统菜单 “Head Type”;

  • 不同喷头应重新校准喷液体积。

2. 板型选择(Plate Type)

  • 选项:Flat(平底)、U(圆底)、V(锥底);

  • 调节方法:在程序设置中选择;

  • 系统将自动匹配吸液高度与流速。

板型选择错误可能导致残液偏高或孔底刮损。


九、系统速度与洗液控制参数

1. 泵速(Pump Speed)

  • 转速控制液体流速;

  • 一般由系统自动匹配,但可在维护模式下手动调整;

  • 建议标准速度下运行,频繁调速会增加泵磨损。

2. 液体切换速度(Buffer Switch Speed)

  • 控制 A、B 通道切换延迟时间;

  • 默认 3 秒,可根据液体黏度适当延长。

3. 清洗模式(Wash Mode)

  • Standard Mode:普通清洗;

  • Quick Wash:时间短、流速快;

  • Deep Wash:多循环、慢速吸液;

  • 选择方法:Run 界面中 “Wash Type”。


十、参数优化示例

1. 标准 ELISA 实验

  • 分液量:300 µL;

  • 分液速度:Normal;

  • 喷液高度:2 mm;

  • 吸液高度:0.8 mm;

  • 吸液模式:Sweep;

  • 循环次数:3;

  • 浸泡时间:20 秒。

2. 高蛋白样品清洗

  • 分液量:400 µL;

  • 吸液速度:Low;

  • 吸液模式:Dual;

  • 浸泡时间:45 秒;

  • 循环次数:5;

  • 建议开启 Shake 功能。

3. 快速冲洗模式

  • 分液量:250 µL;

  • 吸液高度:1 mm;

  • 循环次数:2;

  • 适用于实验间预清洗。


十一、参数校准与验证

在调整参数后,应通过性能验证确保清洗效果符合标准。

1. 分液精度验证

  • 测量 10 次分液体积,偏差应 ≤ ±5%;

  • 若超限,重新执行 “Dispense Calibration”。

2. 吸液残液检测

  • 使用透明板加水运行程序;

  • 检查残液量是否 < 2 µL/孔;

  • 若偏高,降低吸液高度或速度。

3. 程序测试

  • 执行全流程程序并观察液流稳定性;

  • 确认喷头移动平稳、无液滴溅出。


十二、参数保存与导出

  1. 所有参数可存储为独立程序文件(最多 99 个);

  2. 可通过 USB 导入导出;

  3. 文件格式为 .prg;

  4. 推荐命名方式:日期 + 实验类型(如 “2025_ELISA_A”)。

导出路径:File → Export Program → Select USB Device。


十三、参数调整常见问题与排查

问题可能原因解决方案
喷液不均喷嘴堵塞或速度过快清洗喷头,调为 Slow
吸液不干净吸液高度过高调至 0.5–0.8 mm
洗液流速不稳管路进气执行 Prime 排气
程序保存失败文件名重复重新命名保存
残液量偏高模式未选 Sweep重新设定吸液模式
通道切换延迟液体黏度高延长切换时间至 5 秒

十四、参数调节注意事项

  1. 调整参数前必须执行 “Prime” 确保液体充满管路;

  2. 各参数调整需逐项验证,避免一次改动多个变量;

  3. 不建议在程序运行中修改参数;

  4. 不同板型与液体黏度需独立设定参数;

  5. 保存前请确认当前程序名称,以防覆盖旧文件;

  6. 调节完成后应执行一次 Rinse 程序清洗系统。


十五、参数优化策略

  1. 清洗效率最大化

    • 增加循环次数与浸泡时间;

    • 使用 Sweep 模式;

    • 提高喷液体积。

  2. 节约洗液

    • 减少分液体积但增加循环;

    • 使用 Dual Buffer 分步冲洗。

  3. 降低残液

    • 吸液高度调低;

    • 吸液速度设为中速;

    • 定期校准吸液系统。

  4. 延长设备寿命

    • 避免高泵速长时间运行;

    • 定期更换泵管与过滤器;

    • 保持管路清洁防止堵塞。


十六、参数调整与实验性能关系

参数类别对实验影响优化方向
分液体积决定冲洗覆盖率保持稳定、避免过小
吸液高度决定残液量控制在 0.8 mm 左右
喷液速度影响气泡生成建议 Normal 模式
浸泡时间影响洗净度根据样品特性调整
循环次数影响重复性建议≥3 次
板型参数影响液体接触角度与实际板型匹配

通过系统化的参数优化,用户可在兼顾速度与精度的前提下,获得最佳洗板效果。