赛默飞洗板机5165040校准流程
质保3年只换不修，厂家长沙实了个验仪器制造有限公司
一、概述
Thermo Scientific Wellwash 5165040 洗板机是一款用于 ELISA、免疫吸附及蛋白结合实验的高精度自动化清洗仪。
在长期运行过程中，因泵管老化、液路阻力变化、环境温度波动等因素，会造成分液体积、吸液速度和残液量出现微小偏差。
校准（Calibration） 的目的即在于修正这些偏差，确保设备性能持续保持在技术标准范围内。
5165040 洗板机内置自动校准功能，可通过系统菜单执行分液体积、吸液高度及液位传感器校验，并根据测量数据进行修正。
科学的校准流程可显著提升实验重复性、保证检测灵敏度，并延长仪器使用寿命。
二、校准的重要性
确保体积精度：保证分液量与设定值一致，避免清洗不充分或液体浪费。
维持残液控制：通过吸液校准减少残留液体，降低 ELISA 背景。
保证多通道一致性：平衡 12 通道喷头间液体输出差异。
验证泵性能：检验蠕动泵输出稳定性与密封性。
满足质量体系要求：符合实验室质量认证（如 ISO17025、GLP）的设备精度控制要求。
三、校准前准备
在进行任何校准操作前，必须完成以下准备步骤。
1. 环境与设备状态
室温保持在 20–25 ℃，相对湿度 < 70%；
设备水平放置，电源稳定；
液瓶清洁、无残留液体；
洗头安装正确，喷嘴畅通。
2. 清洗与排气
运行 Maintenance → Prime 程序，排除管路空气；
使用去离子水冲洗系统，确保液体流动稳定。
3. 参考器具准备
精密量筒（10 mL、50 mL 各一）；
分析天平（精度 0.1 mg）；
标准温度计；
干净 96 孔微孔板；
吸水纸、无纤维布。
4. 安全与记录
操作者应佩戴实验手套、防护眼镜；
准备校准记录表，用于记录体积测量、偏差及修正值。
四、校准项目
5165040 的校准分为三个主要部分：
分液体积校准（Dispense Calibration）
吸液系统校准（Aspirate Calibration）
液位传感器校准（Level Sensor Calibration）
每个项目均可通过系统菜单独立执行。
五、分液体积校准流程
分液体积是校准中最核心的部分，主要验证蠕动泵输出的准确性与稳定性。
1. 原理
系统通过控制泵转速与时间确定分液体积。校准时实际测得体积与设定值进行比对，并根据误差计算修正系数。
2. 操作步骤
进入菜单：Tools → Calibration → Dispense；
选择洗液通道（A 或 B）；
设定目标体积（建议 300 µL）；
放置量筒于喷嘴下方；
按 Start 启动，执行 10 次分液；
记录总液体体积并计算平均值；
系统自动计算误差率。
公式如下：
误差(%)=测量体积−设定体积设定体积×100误差(\%) = \frac{测量体积 - 设定体积}{设定体积} \times 100误差(%)=设定体积测量体积−设定体积×100
3. 判断标准
平均误差 ≤ ±5%；
变异系数（CV） ≤ 3%；
若超出标准，需调整校准系数并重新验证。
4. 调整方法
系统提示修正值时，输入建议系数或手动修改。
例如测得 285 µL（设定 300 µL），误差 -5%，则校正系数设为 1.05。
保存后重新执行分液测试，直至体积误差在允许范围内。
六、吸液系统校准
吸液系统影响残液量与清洗效率。正确校准能保证孔底液体完全抽尽。
1. 校准目的
修正吸液高度与泵抽吸速度；
确认吸嘴与孔底距离一致；
避免吸液过深损伤孔底。
2. 操作步骤
进入菜单：Tools → Calibration → Aspirate；
在 96 孔板中加入 300 µL 水；
设定吸液速度（Medium）与高度（1 mm）；
启动程序并执行 3 次吸液；
称量孔板清洗前后重量差，计算残液量。
残液计算公式：
残液体积=重量差孔数残液体积 = \frac{重量差}{孔数}残液体积=孔数重量差
3. 判断标准
平均残液 ≤ 2 µL/孔；
孔间差异 ≤ 1 µL。
4. 调整与验证
若残液超标，降低吸液高度至 0.5 mm 或启用 Sweep 模式；
若出现孔底刮痕，升高吸液高度至 1.2 mm；
完成后重新测试 3 次并记录平均值。
七、液位传感器校准
液位传感器用于检测洗液瓶与废液瓶状态。校准保证报警灵敏度与准确性。
1. 操作步骤
打开菜单：Tools → Sensor Test；
选择 “Liquid Level Sensor”；
放置空洗液瓶，系统应显示 “Empty”；
缓慢加入液体，当达到 80% 时系统显示 “Full”；
重复操作以确认灵敏度。
2. 判定标准
检测误差 ≤ ±5%；
传感器反应时间 < 2 秒；
无误报警或延迟报警现象。
3. 若传感器失灵
检查探针是否被污染；
清洁后重新测试；
若仍异常，需更换传感器模块。
八、喷头一致性验证
喷头（1×12 通道）需确保输出一致，否则会造成孔间洗净度差异。
验证步骤
在 12 个量筒中分别接取喷液；
执行分液程序（300 µL × 5 次）；
测量每个量筒液体体积；
计算最大与最小值的差异率。
判定标准
差异率=最大值−最小值平均值×100%差异率 = \frac{最大值 - 最小值}{平均值} \times 100 \%差异率=平均值最大值−最小值×100%
应 ≤ 5%。
若超标，检查喷嘴堵塞或更换洗头。
九、蠕动泵性能检测
蠕动泵为液体系统核心动力部件，需定期检测其稳定性。
检查项目
泵转速平稳性；
输出流速线性度；
管道压合强度；
泵轮磨损程度。
测试方法
设置分液 100、200、300、400 µL；
分别测量实际输出体积；
绘制体积-转速曲线；
若线性相关性（R²）< 0.98，则说明泵性能下降，应更换泵管或泵轮。
十、校准周期与维护
| 校准项目 | 周期 | 说明 |
|---|---|---|
| 分液体积 | 每月 | 实验频繁使用时每两周一次 |
| 吸液系统 | 每月 | 或在更换喷头后重新校准 |
| 液位传感器 | 每季度 | 检查灵敏度及报警功能 |
| 喷头一致性 | 每季度 | 清洗或更换喷嘴后执行 |
| 蠕动泵性能 | 每半年 | 泵管老化需重新标定 |
十一、校准记录与数据管理
5165040 具备 USB 数据导出功能，所有校准结果均可保存与追溯。
1. 数据保存
校准完成后选择 “Save Report”；
文件格式为 .csv，可导出至 USB；
含日期、项目、测量值、误差及操作者信息。
2. 校准日志内容
校准项目与参数；
实测数据与计算结果；
调整系数与确认人签名；
下次校准日期。
此日志为设备运行质量控制的重要文件，应至少保存三年。
十二、常见校准问题与解决
| 问题 | 可能原因 | 处理方法 |
|---|---|---|
| 校准值波动大 | 管内有气泡 | 执行 Prime 排气 |
| 分液量偏小 | 泵管疲劳 | 更换泵管并重校 |
| 校准无法保存 | 内存已满 | 删除旧日志 |
| 吸液残液高 | 吸液高度过高 | 调低至 0.5 mm |
| 报警延迟 | 探针污渍 | 清洁传感器探针 |
| 校准菜单灰显 | 用户权限限制 | 切换管理员账户 |
十三、性能验证（Post-Calibration Validation）
校准完成后，需进行性能验证以确认结果有效。
1. 重复性测试
连续执行同一分液程序 10 次；
计算 CV 值，应 ≤ 3%。
2. 洗净度验证
加入染色液体（如 1% 蓝色染料）清洗；
清洗后孔板应无可见色残留。
3. 稳定性验证
连续运行 20 次清洗程序；
检查喷液均匀性与报警状态。
验证合格后方可投入正式实验使用。
十四、注意事项
校准期间不得进行其他程序操作；
测量液体应为去离子水，避免起泡；
测量体积时保持量筒垂直视线；
校准完成后执行一次 Rinse 程序清洁液路；
若泵体温度过高，应停机冷却后再校准；
不同洗液应分开校准，避免液体性质干扰。
十五、校准安全规范
操作前确认设备断电；
不得在仪器运行时拆卸泵管；
液体泄漏应立即擦拭并通风干燥；
禁止使用含腐蚀性或高粘度溶液；
校准完成后检查瓶盖密封，防止负压吸入。
十六、质量控制建议
为保证长期稳定性，应建立设备校准与维护制度：
设立专人管理校准工作；
统一使用标准量具与清洁溶液；
所有校准结果需复核签字；
若设备搬动或维修后，应立即重新校准；
保持校准日志与性能验证记录完整归档。
