赛默飞洗板机5165000参数调节
质保3年只换不修,厂家长沙实了个验仪器制造有限公司
一、设备参数概览与可调项简介
在开始深入调节之前,先简要回顾该设备的规格以及哪些参数可调、为何需调。
设备为 1×8 通道洗头,适配 96 孔板。规格显示分液体积范围为 50-400 µL,洗液体积(wash volume)范围为 50-1000 µL。
精度方面,在 300 µL 分液体积下,误差 <5%,精密度(CV)<3%。
可调参数包括但不限于:分液体积、吸液体积、分液高度、吸液高度、分液速度、吸液速度、循环次数、浸泡时间、振荡(若启用)、模式选择(如普通 vs Sweep 模式)等。经典资料中指出“By adjusting wash parameters such as the number of wash cycles, soaking time, shaking speed, dispense and aspiration height, and aspiration speed, washing performance can be optimized.”
因此,参数调节的核心在于:将这些可控变量根据板类型、样本性质、残液要求、通量要求等优化至最佳状态。
接下来,让我们逐项展开这些可调参数,阐述其作用、建议范围、调整流程与优化策略。
二、关键参数详细说明与建议范围
以下为各主要参数的说明、建议值及为何调整。
2.1 分液体积(Dispense Volume)
作用:将洗液准确地分配至每孔,用于洗涤前冲入孔内,以覆盖孔壁、溶解残留物、促使悬浮物进入液体。
建议范围:50-400 µL(针对 96 孔板)。
实际建议值:
常规 ELISA:200-300 µL
样本粘稠或沉淀物多:300-350 µL
若通量需求大且样本简单:可尝试接近 200 µL 下限,但需监控残液
为何调整:分液体积过低可能导致覆盖不全、孔壁残留多、洗净效果差;体积过高可提升覆盖但消耗洗液、延长运行时间。
调节建议:先设中值(如 250 µL),运行后测残液量;若残液高、背景大,则增加体积;若残液低、时间较长且洗液成本高,则适当降低。
2.2 吸液体积(Aspirate Volume)
作用:分液后从孔内抽取洗液及残液,去除大部分液体。
建议设置:通常吸液体积略小于分液体积,如分液 300 µL,则吸液可设为 280-290 µL,或设定近乎完全抽净模式结合 Sweep 模式。
为何调整:吸液体积太低残液量增加;太高可能触底、损伤孔板或带气泡。
调节策略:测定残液量后,如残液 >2 µL,逐步增加吸液体积或改用 Sweep 模式。如果孔底为 V 形或星型,应提高吸液高度(见下节)而不是简单增加体积。
2.3 分液高度(Dispense Height)
作用:分液喷头与孔壁/孔底的距离。
建议设置:标准平底板推荐喷头离孔壁约 2-3 mm;对于 V 形或星型底板,建议更高(如 3-4 mm)以避免喷头触底。
为何调整:喷头离孔底过近可能刮底、产生气泡、损伤板;离得过高可能洗液击打底部溅起、覆盖不均。
调节策略:初次设定为 2 mm,运行观察是否有喷出气泡或喷头触底声音。若发现问题,提高高度或降低速度。
2.4 吸液高度(Aspiration Height)
作用:吸液喷头从孔内抽液的位置,决定是否最大限度去除残液。
建议设置:建议距孔底约 1-2 mm(平底板);对于底部形状异(V、星型)建议 2-3 mm。
为何调整:高度设太低会刮底或带入颗粒;太高则残液量增加。
调节策略:测定残液量;若残液偏高,降低吸液高度;若带底物或颗粒,提升高度或采用清扫模式。
2.5 分液速度/吸液速度(Speed)
作用:控制液体流入孔或被抽出的速率。
建议设置:
分液速度:中速为默认;对于简单样本可高;对于粘稠液体或敏感实验建议慢速。
吸液速度:同理建议中速,不宜太快以避免扰动液体或带气泡。
为何调整:速度过快可能产生气泡、搅动孔内残留物、溅液;速度过慢影响通量。
调节策略:初次设中速,观察泡沫或液面扰动情况。如气泡多、溅液多,转为慢速;若样本简单且通量要求高,可尝试快速模式。
2.6 循环次数(Wash Cycles)
作用:一次程序中执行“分液→吸液”循环的次数,决定洗涤强度。
建议设置:3-5 次为常见。
为何调整:循环次数太少可能残液多、洗不彻底;次数过多耗时、洗液消耗大、通量低。
调节策略:根据残液检测结果调整。如果残液量满足要求且通量优先,则可选择 2-3 次;若追求极低残液及高灵敏度检测则 4-5 次。
2.7 浸泡时间(Soak Time)与振荡(Shake)
作用:在分液后暂时停留或振荡,使洗液更好渗透孔壁残留物。
建议设置:浸泡时间 0-60 秒;振荡(若启用)低速 5-10 秒。
为何调整:样本若为高粘蛋白、沉淀物、细胞贴壁残留物等时,需要更长浸泡/振荡;简单液体样本可减少或禁用。
调节策略:若洗净效果差、残液多且背景高,尝试加入浸泡时间或振荡步骤。若通量为优先且样本简单则可省略。
2.8 模式选择(普通模式 vs 清扫模式 Sweep)
作用:决定吸液策略。Sweep 模式在两个高度进行吸液,从而降低残液量。资料指出“Crosswise sweep aspiration mode … minimizes residual volumes.”
选用建议:
普通模式:通量优先、样本简单、成本敏感。
Sweep 模式:残液极低要求、信号敏感或背景要求高。
调节策略:若发现残液已非常低且通量为优先可用普通模式;若残液仍偏高或检测灵敏度极其重要,则切换为 Sweep 模式并配合更多循环或更高分液体积。
三、操作步骤:如何进入参数调节并执行
以下为在设备上实际进入参数调节界面、修改参数、保存并执行的流程。建议培训时操作一遍,对应理论参数说明。
3.1 进入设置菜单
开机并等待自检完成。
通过主界面进入 “Settings” 或 “Protocol” 菜单。根据手册,参数设定在 “Settings > Prime parameters”,“Main Menu > Steps” 等位置。
在“Settings”菜单中可设定通用系统参数(如 Prime 体积、自动冲洗、语言、液位监测开关等)。
在“Protocol”或“Steps”菜单中编辑当前用程序,或新建程序。
3.2 编辑参数
在程序编辑界面,选择 “Steps” → “New step” 添加所需步骤(如 Dispense、Soak、Aspirate)。
点击所添加步骤,进入参数编辑页面,输入或选择体积、高度、速度、时间、循环次数等。
例如:Step 1 Dispense → 300 µL,Height 2 mm,Speed 中速。
Step 2 Soak → 30 s。
Step 3 Aspirate → 280 µL, Height 1.5 mm, Speed 中速。
Loop these three steps 3 times。
在设置菜单中选择模式(普通/Sweep)。若选 Sweep,还可设两个吸液高度。
保存所有参数,命名程序(如 “HighSens_4x300_Sweep”)。
将程序保存至设备,亦可导出程序至 USB 做为备份或跨设备导入。
3.3 运行 &验证
将微孔板放入,确认板在位检测已通过,洗液瓶、废液瓶液位正常。
选择刚保存的程序,点击“Start”运行。观察设备分液、吸液动作是否平稳、无异常声音或喷头触底。
程序结束后,取板并测定残液量、背景情况、信号稳定性。依据结果决定是否需再次调节参数。
四、优化建议与情景应用
对于不同样本类型/实验目标,应有针对性的参数优化。以下是若干典型情景及建议。
4.1 高通量常规检测
分液:200 µL、吸液:180 µL
分液高度:2 mm、吸液高度:1.5 mm
循环次数:2-3 次
模式:普通
此设定节省时间与洗液,适用于样本简单、背景低、重复率高的日常检测。
4.2 低背景高灵敏检测
分液:300 µL、吸液:280 µL
循环次数:4 次
模式:Sweep
添加浸泡时间:45 秒
适合抗体–抗原结合紧密、样本中有低丰度目标、要求极低残液的应用。
4.3 粘稠或血清样本
分液:350 µL、吸液:330 µL
分液高度:3 mm、吸液高度:2.5 mm
循环次数:4-5 次
模式:Sweep
浸泡时间:60 秒
这种情况下更强调液体覆盖、残液控制和样本分散。
4.4 快速预筛查模式
分液:180 µL、吸液:160 µL
循环次数:2 次
模式:普通
用于初筛、样本量大、对背景容忍度较高的情况。
Five、注意事项与常见问题应对
5.1 注意事项
每次更换板型(如从平底改为 V/U 型)后,应重新调整高度参数。
在更换洗头、管路或长时间停机后,应重新校验参数。
保存旧参数并命名清晰,便于恢复。
在调整参数后务必测定残液量、背景、重复性,保证调节正确。
若改动参数较大,建议先运行空板或标准板确认。
5.2 常见问题与对策
残液量偏高:检查吸液高度是否过高、循环次数是否过少、模式是否为普通模式。
喷头触底或产生气泡:提高分液高度、降低分液速度。
分液或吸液时间太长、通量低:可尝试降低体积、减少循环次数、转为普通模式。
多通道流量差异大:可能某通道管路堵塞或软管老化,应检查并清理。


