质保3年只换不修，厂家长沙实了个验仪器制造有限公司

一、清洗程序设计思路

在使用该设备进行例如 ELISA 等 96 孔板清洗操作时，需要设计一个合理的程序，确保洗液分配、废液吸除、残液量低、重复性好。程序设计主要包括以下几方面：

1. 洗板类型与洗头匹配。该型号为 1×8 通道洗头，适用于标准 96 孔板。 

2. 确定洗步数／循环次数：通常根据实验需求（抗体-抗原结合强度、背景要求、样本粘稠度等）决定循环次数。

3. 决定洗液 (Dispense) 体积、吸液 (Aspire) 体积、清洗体积 (Wash volume)、残液目标值。该设备残液量低于 2 µL，可通过设定“Sweep”模式获得更低残液。 

4. 设定分液／吸液高度、吸液／分液速度、浸泡时间、是否振荡（Shaking）等附加参数，以优化清洗效率。

5. 安全检测／预处理：包括板检测、液位监测、管路预冲（Prime）等。 

基于以上思路，下面将按照典型操作流程展开清洗程序的各步骤。

二、清洗程序参数设定指南

在设置清洗程序前，应先进入设备主界面菜单，选择“新建程序”或在已有模板上编辑。以下参数建议供参考，并可根据具体实验调整。

2.1 板型与循环次数

• 板型选择：一般为 96 孔板（Landscape 模式），对应 1×8 洗头。

• 循环次数（Wash Cycles）：建议设置为 3-5 次，对于背景低、结合弱的检测可设 2-3 次；对于粘稠样本或高结合、要求低残液可设 4-5 次。

• 是否开启预洗（Pre-wash）或 Prime：建议每次操作前执行一次“预冲”程序，以清除管路内气泡。

2.2 液体体积参数

• 分液（Dispense Volume）：建议范围 200-300 µL／孔（设备允许 50-400 µL）；若样本或洗液较浓，可增加至 350-400 µL。

• 吸液（Aspire Volume）：可设为略低于分液量，例如 180-280 µL，以确保吸尽底部残余。

• 清洗体积（Wash Volume）：建议设为 500-1000 µL／孔以保证孔壁充分清洗（设备支持 50-1000 µL）

• 预冲体积（Prime Volume）：典型为 5-100 mL，总管路冲洗用，设备规格支持此范围。 

2.3 吸液／分液高度与速度

• 吸液高度（Aspire Height）：距离孔底约 1-2 mm（平底板为例）；如果使用 V-底或星形底板，应提高至 2-3 mm，以避免洗头挂底。

• 分液高度（Dispense Height）：距离孔壁约 2-3 mm，确保洗液沿孔壁均匀分布。

• 吸液速度（Aspire Speed）：建议中速，如样本较粘稠可设为慢速。

• 分液速度（Dispense Speed）：可为中高速，以提高通量，但要注意不要引起气泡或溅落。

2.4 浸泡、振荡与模式选择

• 浸泡时间（Soak Time）：建议 30 秒左右，如抗体-抗原结合较紧密或样本复杂，可增加至 60 秒。

• 振荡功能（Shake）：如设备支持，可设低速（例如约 5 Hz，振幅 2.5 mm）以促进洗液与孔壁接触。设备说明中有振荡速度等级。

• 模式选择：可选择“普通模式（Normal）”或“清扫吸液模式（Sweep）”。Sweep 模式可在两个不同高度吸液，从而极大降低残液。 

2.5 安全检测与程序保存

• 启用“板在位检测”（Plate Presence Sensor）：若无微孔板放置，则仪器不启动。

• 启用“液位监测”：洗液瓶或废液瓶液位异常时设备报警并停止操作。

• 确认气溶胶盖已关闭并安装妥当，尤其处理有生物危险样本时。

• 保存程序至设备内部，建议为操作命名如 “ELISA-Wash3x200” 等，以便重复调用。设备一般可存储多个程序。

三、清洗程序执行流程详解

下面逐步说明从启动前准备到程序结束的具体流程，结合上述参数完成一次典型清洗。

3.1 启动准备

1. 设备通电，系统进行自检。

2. 检查洗液瓶（Buffer A）是否装有合适洗液，检查废液瓶是否空或未满。

3. 将微孔板放入板托架中，并确保板被夹持器固定、位置正确。

4. 确保气溶胶盖关闭，安全防护就绪。

5. 执行预冲（Prime）程序：仪器将洗液从洗液瓶推入管路，清除气泡、润滑系统。

6. 如发现气泡、管路阻塞或洗头移动异常，应立即停止、检查。

3.2 程序启动与分液阶段

1. 在主界面选择已保存的程序，确认参数。

2. 设备将洗头移动到微孔板上方，定位好洗头位置。

3. 启动分液：洗头从洗液瓶抽取设定体积（如 200 µL），然后按设定高度分液至每孔。

4. 在分液过程中注意观察：洗液是否均匀分布、无滴漏、无气泡或飞溅。若发现异常，可停止并重新调整分液高度／速度。

3.3 洗循环阶段

1. 设备按照设定循环次数（如 3 次）执行：分液 → 吸液。

2. 吸液时洗头下降至设定高度（如 1-2 mm以上），抽取剩余液体。若模式为 Sweep，则先在较高位置吸液，再降至底部位置再次吸液，从而降低残液。

3. 若设定浸泡时间，则在分液后暂停设定秒数，让洗液充分作用于孔内壁。

4. 若设定振荡，则洗头或孔板会以低频振荡，帮助洗液覆盖底壁。

5. 每循环结束后，系统自动移动至下一列/行继续操作，直到全部孔洗完并完成设定循环次数。

3.4 吸废液与结束阶段

1. 所有循环完成后，设备执行废液吸取：将井中残液通过洗头通道排入废液瓶。

2. 显示屏提示“程序完成”，用户可从板托架中取出微孔板。

3. 建议立即进行“冲洗通道”程序或部分清洗流程，以防止管路内残液干涸或结晶。

4. 废液瓶应及时清空、清洗、更换洗液瓶并做好记录。

四、清洗模式与残液控制分析

该仪器提供多种清洗模式，其中“普通模式”与“Sweep 模式”是最常用。理解其作用可帮助用户优化残液量和数据重复性。

4.1 普通模式（Normal）

在普通模式下，洗头下降至预设高度（如 1-2 mm），然后开始吸液。此模式操作速度快、流程简单。
优点：通量高、操作快速。
缺点：残液量相对较高，可能达几 µL，若目标是极低背景或高灵敏检测，则可能不够理想。

4.2 清扫吸液模式（Sweep）

Sweep 模式则在两个高度位置进行吸液：首先在较高位置（如孔壁处）吸取液体，随后洗头下降至底部再次吸液，从而更彻底地移除残余液体。 
此模式可将残液量降低至不足 2 µL，甚至更低。
优点：残液量极低，有助于提高信号-背景比、增强检测灵敏度。
缺点：执行时间略长、耗洗液略高；不适合通量要求极高且背景允许大一点的场合。

4.3 模式选择建议

• 若为常规 ELISA、背景允许，可选择普通模式以提高通量。

• 若为高灵敏检测、信号弱或样本复杂（如血清、高蛋白、粘稠介质），建议启用 Sweep 模式。

• 每次模式切换后建议做残液检测（可用染料/显色反应测定残液量）以验证实际效果。

五、优化建议与应用场景

优化建议

• 确保洗液品质：使用过滤、脱气后的缓冲液，避免气泡、颗粒堵塞洗头或管路。

• 定期校准吸液／分液体积，确保分液体积／吸液体积准确。设备规格为 50-400 µL 分液体积范围。 

• 建议固定使用一套参数（如分液体积、循环次数、吸液高度）以保证实验重复性。

• 定期检查管路及洗头，避免洗头堵塞、管道弯折、气泡或残液积累。

• 对于不同板底（平底、U-底、V-底、星型底）应调整吸液高度／分液高度，以适应孔体几何差异。

• 保持废液瓶及时清理并更换洗液瓶，避免废液积累或交叉污染。

• 建议将 USB 程序模板导出并在多台设备间共享，实现实验流程标准化。

应用场景

• 常规 96 孔 ELISA 检测：使用普通模式、分液 200-300 µL、循环 3-4 次。

• 高灵敏度免疫检测：启用 Sweep 模式、分液 300-350 µL、吸液高度低、循环 4-5 次。

• 多样本、高通量筛选：可考虑将循环次数减少（如 2 次），提升速度但牺牲部分残液控制。

• 若将来扩展至细胞洗涤、384 孔板等应考虑升级设备型号。

六、注意事项与故障防范

注意事项

• 洗液和废液瓶均为非加压设计，确保安全使用。 

• 在处理可能含有病原体样本时，务必关闭气溶胶盖并采取生物安全措施。

• 洗头不得直接触碰孔底或孔壁，以防刮伤底板或产生交叉污染。

• 洗液体积、循环次数设定应考虑样本类型、板底形式、抗原-抗体反应强度等。

• 程序修改后应进行验证测试（例如残液量测定、背景-信号比对）确保效果。

• 长时间不使用设备时，应执行管路冲洗／保护程序，避免残液沉淀或结晶。

常见故障与处理

• 残液量过高：可能是吸液高度设定太高、分液高度不当、模式未切换为 Sweep。建议降低吸液高度、启用 Sweep 模式、增加循环次数。

• 洗头滴液／溢液：可能分液速度过快或洗液滴落于板外。建议降低分液速度、检查洗头密封状况。

• 液体抽不动／无洗液抽入：可能洗液瓶液位过低、管路气泡、泵故障。建议检查液位、执行预冲、查看泵状态。

• 板未识别：板传感器故障，或板放置不正确。建议确认板是否按规范放置、传感器是否脏污。

• 程序结束但残液仍多：可能循环次数不足、浸泡时间太短、洗液体积过小。建议适当增加循环次数、延长浸泡时间、增大洗液体积。