质保3年只换不修，厂家长沙实了个验仪器制造有限公司

一、仪器概述

Invitrogen Countess 3 自动细胞计数仪是赛默飞公司推出的一款基于图像识别和AI算法的全自动细胞计数设备。其主要用途是快速、准确地完成哺乳动物细胞、酵母、昆虫细胞等样本的活细胞计数和活性分析。仪器采用先进的光学系统与智能成像算法，能够在短时间内自动识别细胞、区分活细胞与死细胞，并计算总细胞浓度、活性百分比、平均直径、大小分布等多项参数。
与传统血球计数板方法相比，Countess 3极大地提高了效率和重复性，避免了人为误差，并能自动生成可追溯的数据报告。其操作简便，适用于细胞培养、转染实验、细胞系建立、药物筛选及生物反应器监测等研究领域。

二、仪器构成与主要功能

1. 仪器外观与结构

Countess 3采用一体化紧凑设计，主要由以下几个部分组成：

• 主机主体：内置光学显微镜系统和触控显示屏；

• 插槽部位：用于放置一次性计数芯片或可重复使用载片；

• USB接口与网络接口：便于数据导出与连接实验室管理系统；

• 电源接口与散热口：保证设备稳定运行。

2. 光学与图像系统

仪器内置高分辨率CMOS成像传感器与LED照明系统，支持明场成像和荧光检测。用户可通过不同检测模式实现普通细胞计数或荧光标记细胞分析。

3. 软件功能

Countess 3搭载智能操作系统，可自动识别样本类型，执行聚焦、曝光优化、细胞边界识别、死活判断与数据统计。系统可输出直方图、散点图及数值报告，并支持数据导出为CSV或PDF格式。

三、实验前准备

在使用Countess 3进行细胞计数前，应完成以下准备工作：

1. 仪器检查：确保仪器处于干净、稳定的环境，无灰尘、振动或强光干扰；确认电源线连接牢固，触屏显示正常。

2. 软件初始化：开机后，系统自动进入主界面，检查软件版本及校准状态。若长期未使用，建议执行系统自检或镜头校准程序。

3. 计数芯片准备：可选用一次性Countess Cell Counting Chamber或可清洗重复载片。使用前应保持清洁，避免指纹或气泡残留。

4. 样品处理：将细胞样本充分混匀，必要时进行稀释。若需检测活性，可加入0.4%台盼蓝（Trypan Blue）等活死染料，通常按1:1比例混合后立即上样。

四、详细操作步骤

1. 开机与界面设置

按下电源键启动仪器，进入主菜单界面。系统启动约需30秒。触控界面包括“新建实验”“历史数据”“设置”等模块。
在“设置”中可调整：

• 显微放大倍率（默认10×）；

• 成像模式（明场或荧光）；

• 单位显示（cells/mL或×10⁶/mL）；

• 数据保存路径与命名规则。

2. 样品制备

1. 吸取10 µL均匀混合后的细胞悬液；

2. 若使用一次性计数芯片，将样品滴入芯片入口，液体通过毛细作用自动填充计数腔；

3. 若使用可重复载片，则轻轻盖上盖玻片，避免产生气泡。

操作时应保持样品均一性，以防止细胞沉降造成计数偏差。

3. 放入样品

将计数芯片插入仪器样品槽，轻推至定位位置。系统会自动识别芯片类型并进入成像预览界面。

4. 图像聚焦与曝光调整

仪器具备自动聚焦功能。点击“自动聚焦”按钮后，镜头系统会扫描样本深度，选择最佳焦平面。
如自动聚焦效果不理想，可通过手动调整滚动条微调焦距，使细胞边界清晰可见。
曝光时间可自动设定，也可根据细胞亮度手动修改，保证图像对比度适中、细胞边缘锐利。

5. 图像采集与分析

当图像显示清晰后，点击“捕获图像”。系统将在几秒内完成图像采集与AI识别分析，自动区分活细胞与死细胞并生成结果。
分析结果包括：

• 总细胞数（Total Cell Count）；

• 活细胞数（Live Cell Count）；

• 死细胞数（Dead Cell Count）；

• 活性百分比（Viability %）；

• 平均直径（Mean Diameter）；

• 细胞大小分布直方图。

若需进一步确认识别效果，可在结果图上手动选择区域或放大观察。

6. 数据保存与导出

分析完成后，点击“保存”按钮。系统支持多种数据输出方式：

• 保存至本地仪器内存；

• 导出为CSV或PDF文件；

• 通过USB导出至移动设备；

• 通过网络上传至实验室数据管理系统（LIMS）。

用户可在命名界面输入样品编号、操作者姓名、时间戳等信息，便于追踪管理。

五、结果解读与质量控制

1. 活性判断原理

仪器通过检测染料透过性判断细胞活性。台盼蓝无法穿透完整的细胞膜，因此活细胞呈透明状态，而死细胞染成蓝色。系统依据灰度差异与细胞形态自动分类。

2. 常见误差来源

• 样品混匀不足：易导致细胞沉积或聚集，影响计数精度；

• 染料比例不当：过量染料会误判活性，比例不足则死细胞染色不充分；

• 气泡与杂质：会被误识为细胞，需注意操作清洁；

• 焦距偏移：成像模糊会降低识别准确性。

3. 精度验证

建议定期使用标准细胞悬液进行比对实验，校验仪器准确度。若与手动计数差异超过10%，应执行系统重新校准。

六、荧光模式使用说明

Countess 3具备荧光检测功能，可用于带有GFP、RFP、DAPI等荧光标记的细胞分析。
操作要点如下：

1. 选择“Fluorescence”模式；

2. 在荧光通道设置中选择所需激发波段；

3. 根据信号强度调整曝光时间和增益；

4. 捕获图像后，系统会分通道显示并可叠加分析；

5. 结果界面可导出荧光强度分布及细胞比例信息。

此功能适用于细胞转染效率评估、细胞周期分析、凋亡检测等实验。

七、数据管理与维护

1. 数据管理

仪器内置存储空间可存放上千条结果记录。用户可通过筛选样品名、日期、操作者快速检索数据。
建议定期备份，以防数据丢失。可连接外部硬盘或局域网服务器实现自动同步。

2. 仪器清洁与维护

• 每次实验后，用无尘纸巾擦拭镜头表面；

• 定期用70%乙醇清洁样品槽与外壳；

• 若长期不使用，应断电存放于干燥环境；

• 避免使用腐蚀性溶剂清洗，以免损伤镜头。

3. 软件升级

仪器可通过USB或网络进行固件升级。升级前应备份全部数据。更新完成后，系统自动重启并显示新版本号。

八、安全注意事项

1. 实验过程中应佩戴实验手套和防护镜，避免直接接触细胞样品及染料。

2. 仅使用赛默飞官方配套的计数芯片或载片，以保证光学匹配和密封性。

3. 不得在仪器内放置超出规定厚度的材料，以防镜头损伤。

4. 若检测含病毒、放射性或生物危害样品，应在生物安全柜内完成样品处理，并遵循相关安全规范。

九、应用拓展

Countess 3不仅适用于常规细胞计数，还可结合其他生物实验进行综合分析，例如：

• 细胞增殖监测：定期检测细胞数量增长曲线；

• 转染效率分析：结合荧光标记判断阳性细胞比例；

• 细胞活性评估：药物处理前后活性比较；

• 细胞大小分布研究：用于细胞周期阶段或分化状态推测。

仪器的高灵敏度和自动化特征，使其可在科研、制药、临床检验等多个领域广泛应用。

十、常见问题与解决方案