博日荧光定量PCR仪FQD-16B是一款小型化、高精度的实时荧光定量PCR检测设备,主要应用于基因表达研究、病原体检测、遗传突变分析、食品安全监测及教学实验等场景。该型号采用16孔设计,适合中小通量实验,兼具灵活性和经济性。
主要特点:
高精度温控系统:温度控制精确到±0.2℃,升降温速度快。
多通道荧光检测:支持常见荧光染料,如FAM、HEX、ROX、Cy5。
强大的数据分析能力:支持绝对定量、相对定量、熔解曲线分析、SNP分型等。
体积小巧:节省实验室空间,便于携带,适合教学和移动检测。
实验室温度保持在18℃~30℃之间,相对湿度不超过80%。
避免强烈电磁干扰,保持环境清洁、通风。
放置仪器的实验台需稳固、平整。
使用220V±10%的交流电,50/60Hz。
插座必须接地,避免与大功率电器共用插排。
16孔专用反应板或反应管。
光学透过性良好的封膜或透明管盖。
移液枪、枪头、核酸酶无污染耗材。
高质量的DNA/RNA样品,避免降解。
PCR预混液、荧光探针或染料。
合适的引物和对照样品(阳性、阴性)。
按照实验设计配制PCR反应体系,建议体积在10~25 µL之间。
将反应液加入反应管或反应板,注意避免气泡。
使用光学封膜或透明管盖密封,防止蒸发。
打开加热盖,将反应板平稳放入槽内,确保与金属模块贴合紧密。
检查四角是否对齐,避免翘起或偏移。
合上加热盖,确认压力适中。
打开电源开关,系统自动启动进入主界面。
输入用户名和密码登录(管理员可设置权限)。
根据需要选择“新建实验”、“调用模板”或“查看数据”。
温度循环:设置变性、退火、延伸温度与时间。
循环次数:通常为35~45次。
加热盖温度:建议设定105℃,防止蒸发和冷凝。
荧光通道:根据染料选择采集通道。
采集点:在退火或延伸阶段进行荧光采集。
确认程序设置无误后点击“开始”。
实验过程中可实时查看扩增曲线与数据。
若实验异常,可使用暂停功能调整。
理想曲线应呈S型,指数期明显上升,平台期平稳。若曲线不规则,需检查引物设计或反应体系。
Ct值是荧光信号超过阈值的循环数。Ct值低表示样品初始模板浓度高;Ct值过高或无Ct值则提示样品中目标核酸浓度极低或反应失败。
使用标准品建立标准曲线。
通过Ct值计算样品拷贝数。
以内参基因为标准,比较不同样品间目标基因的表达差异。
常用ΔCt或ΔΔCt方法进行计算。
通过逐步升温监测荧光信号变化,判断产物特异性。
单一峰值表示扩增特异性好,多峰或拖尾提示存在非特异性产物。
通过不同荧光探针区分单核苷酸变异,广泛应用于遗传学研究。
系统可自动生成分析报告,包括扩增曲线、熔解曲线、Ct值表格、标准曲线等。
支持导出为PDF、Excel等格式。
每次实验后清洁仪器外壳,用无尘布擦拭。
保持反应槽无尘、无水渍。
定期检查光学窗口,必要时用专用棉签清洁。
定期更新软件,确保功能完善和漏洞修复。
数据定期备份至外部存储。
遇到温控或光学故障,应联系厂家工程师。
禁止用户自行拆解光学系统或电路部分。
操作者应佩戴实验手套和护目镜,避免接触试剂。
核酸样品需在生物安全柜内处理,避免污染。
PCR产物属于高浓度核酸,应单独存放或销毁,避免扩散。
实验区应分为试剂准备区、加样区和扩增区,严格分区操作。
使用结束后关闭电源,拔掉电源线。
问题:Ct值过高
原因:样品浓度过低或降解。
解决:提高样品浓度或重新提取核酸。
问题:无扩增曲线
原因:引物设计不当、体系配置错误。
解决:检查引物、探针与体系。
问题:曲线出现多峰
原因:非特异性扩增或污染。
解决:优化引物设计,提高退火温度,加强防污染措施。
问题:信号不稳定
原因:光学模块有灰尘或封膜透光率不足。
解决:清洁光学窗口,更换合格耗材。
科研应用:基因表达分析、RNA定量、分子克隆验证。
医学诊断:病毒、细菌等病原体定量检测,肿瘤标志物研究。
食品安全:转基因检测、食品中致病菌检测。
环境监测:水体、土壤中微生物污染监控。
教学实验:直观展示PCR扩增过程,提高学生实验技能。
博日荧光定量PCR仪FQD-16B以其精确的温控、多通道荧光检测、强大的数据分析和友好的操作界面,为科研与应用检测提供了高效、稳定的解决方案。掌握其使用说明,遵循标准操作流程和注意事项,能有效保证实验结果的可靠性和可重复性。无论是在科研实验室、医院检测科,还是在食品安全与环境监控领域,FQD-16B都展现出广泛的应用价值。
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