宏石荧光定量PCR仪SLAN-48P是一款48孔中通量的实时荧光定量PCR系统,适合临床检测、科研实验与教学培训。该仪器在设计上兼顾精准性与便捷性,内置高精度温控模块和多通道光学检测系统,支持绝对定量、相对定量、多重检测及熔解曲线分析。
其主要特点包括:
体积适中:适合中小型实验室。
高稳定性:温控均一性好,光学系统灵敏度高。
操作便捷:图形化界面,支持模板调用。
结果可靠:数据可追溯,符合质量管理体系要求。
实验环境
温度保持在18–28℃,湿度40%–70%。
放置在稳固的实验台上,避免震动和阳光直射。
保持空气流通,避免灰尘进入设备。
人员要求
操作者需接受培训,掌握分子生物学基础。
全程穿戴实验服、手套及防护眼镜。
耗材与试剂
使用适配的48孔反应板或管。
模板需通过标准核酸提取步骤获得,保证纯度。
PCR反应体系需新鲜配置,避免试剂反复冻融。
开机与自检
打开电源,系统自动进行光学与温控模块检测。
若发现异常,软件界面会提示。
PCR体系配置
在无核酸酶环境中准备反应体系。
成分包括模板、引物、探针或染料、缓冲液、Mg²⁺、dNTP和酶。
上样与封板
将体系加入反应孔,每孔体积20–50 μL。
使用透明封板膜密封,避免蒸发和污染。
样品放置
打开样品仓,放置反应板,方向与定位标识必须正确。
确保反应板平稳,不可倾斜。
实验程序设定
输入循环程序参数,包括变性、退火、延伸阶段温度与时间。
设定荧光采集点和熔解曲线条件。
实验运行
点击“启动”,系统自动运行PCR循环并实时采集荧光信号。
实验进程可在界面上实时监控。
实验完成
系统自动保存实验数据。
取出反应板,妥善处理实验废弃物。
循环程序
预变性:95℃,1–2 min。
变性:95℃,15–30 s。
退火/延伸:55–65℃,30–60 s。
循环次数:35–45次。
荧光采集
SYBR Green体系:退火或延伸阶段采集。
TaqMan探针体系:延伸阶段采集信号最佳。
熔解曲线
升温范围:60–95℃。
升温速率:每步0.3–0.5℃。
样品管理
软件支持手动输入样品编号与批量导入。
界面直观显示48孔布局。
扩增曲线
Ct值反映模板丰度,Ct越低说明浓度越高。
曲线应平滑,指数期上升明显。
标准曲线
根据系列稀释标准品建立,斜率与相关系数评估扩增效率。
理想效率在90%–110%。
熔解曲线
单峰说明扩增特异性好。
多峰提示引物二聚体或非特异性扩增。
统计与分析
软件支持ΔCt、ΔΔCt方法。
提供均值、标准差和显著性分析功能。
上样操作需避免气泡,防止干扰荧光检测。
每个实验必须设置阳性、阴性和无模板对照。
实验运行中不得随意开关样品仓。
封膜必须紧密,避免反应体系蒸发。
实验结束后立即导出数据并备份。
无扩增信号
检查模板浓度与质量。
确认程序设置与荧光通道是否正确。
曲线异常
可能是试剂降解或体系污染。
更换试剂并重新配置。
重复性差
检查移液是否准确,孔板密封是否良好。
避免边缘效应。
熔解曲线多峰
调整退火温度,重新优化引物。
选择探针体系以提升特异性。
日常维护
实验后清洁设备外表与样品仓。
保持环境干燥通风。
光学系统
定期擦拭光学窗口,避免灰尘积累。
光源衰减时需更换并重新校准。
检查风扇是否正常工作。
每年进行温控一致性校准。
软件与数据
定期升级软件。
建立多重数据备份机制。
电源管理
使用稳压电源,避免电压波动损坏设备。
实验结束后应正确关机并切断电源。
样品与废弃物处理
遵守生物安全规范,分类收集和灭活处理。
防止核酸污染扩散。
人员安全
操作人员必须佩戴个人防护用品。
不得在运行中开启光学模块仓门。
临床检测
用于病原体核酸快速检测,适合中小规模实验。
自动生成检测报告,符合临床规范。
科研应用
支持基因表达研究、突变检测、药物反应评估。
灵活的多重检测功能满足复杂实验需求。
教学培训
界面直观、操作简便,适合课堂展示和学生实训。
有助于培养分子检测技能和实验思维。
宏石荧光定量PCR仪SLAN-48P是一款兼具高性能与易用性的实时荧光定量检测设备。通过科学的实验准备、规范的操作流程、合理的程序设置和严格的数据分析,用户能够在临床、科研和教学中获得准确可靠的结果。本操作手册为使用者提供了系统化的操作指南,有助于提升实验室的工作效率与标准化水平。
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