宏石荧光定量PCR仪SLAN-48P是一款中通量的实时荧光定量PCR系统。它能够在一次实验中同时完成48个反应孔的扩增和检测，特别适合日常检测和中小规模实验室应用。
样品仓：容纳48孔反应管，密封性强。
光学系统：配置多通道滤光片，可检测多种荧光染料。
温控模块：升温降温迅速，保证控温精度。
通讯系统：通过USB或网线与计算机连接。
室温18–30℃，湿度30%–80%。
避免阳光直射和强电磁干扰。
实验台稳固、防震，环境保持清洁。
耗材：48孔反应管、光学封膜。
试剂：PCR预混液、引物、探针或荧光染料。
样品：DNA或RNA模板（RNA需先反转录）。
阴性对照：不含模板，用于检验污染。
阳性对照：标准模板，用于验证体系有效性。
重复孔：建议每个样品设置重复，确保结果稳定。
PCR预混液：10µL
上游引物：0.5µL
下游引物：0.5µL
探针或染料：0.5–1µL
模板DNA/cDNA：2–5µL
无核酸酶水：补足至20µL
在无污染区内操作，佩戴手套。
每次移液需更换枪头。
加样完成后轻轻离心，消除气泡。
打开软件，点击“新建实验”。
输入实验名称、操作者和保存路径。
初始变性：95℃，2–3分钟。
循环步骤：
变性：95℃，10–15秒；
退火：55–65℃，20–30秒；
延伸：72℃，20–30秒。
循环次数：35–45次。
采集点：通常设在退火或延伸阶段。
选择相应的荧光通道，如FAM、HEX、ROX、CY5。
多重实验需为不同靶标分配不同通道。
在软件的48孔界面中输入样品编号。
标注阴性和阳性对照。
可使用颜色标记不同分组。
将反应管轻放入样品仓，注意方向。
关闭舱盖并锁紧，确保密封。
在软件中点击“开始运行”。
实验过程中，软件实时显示扩增曲线和温度曲线。
检查阴性对照是否保持无信号。
观察阳性对照是否在合理Ct范围内出现曲线。
若有异常，软件会发出提示。
理想曲线应呈现S型。
阳性对照应有稳定曲线，阴性对照应无曲线。
软件自动计算Ct值。
用户可根据曲线情况手动调整阈值。
使用标准模板绘制标准曲线。
R²≥0.98，PCR效率在90%–110%之间为理想值。
单峰表示产物特异性好。
多峰说明存在非特异性扩增或引物二聚体。
软件可导出Excel、PDF、Word、图片等格式。
报告包含曲线图、Ct值表格、实验参数等。
Ct值过高或无扩增
模板量不足或降解。
试剂失效，需更换。
熔解曲线出现多峰
说明有非特异性扩增。
需提高退火温度或优化引物。
重复性差
原因可能是加样不一致、气泡或封膜不严。
软件无法连接仪器
检查USB或网线是否接触良好。
重启软件和仪器。
实验结束后，及时取出反应管。
用无水乙醇清洁样品仓。
定期擦拭光学窗口，避免灰尘和试剂污染。
定期进行校准，确保温控精度。
长期停机时切断电源，覆盖防尘布。
存放环境干燥通风。
先检查环境与仪器：确保温湿度合适，电源与连接正常。
规范配置反应体系：避免污染，设置对照。
正确设定软件参数：温度、循环、通道、样品布局。
实时关注运行状态：监控曲线，及时发现异常。
分析与导出结果：根据扩增曲线、Ct值和熔解曲线综合判断。
注重维护：定期清洁、校准，确保长期稳定运行。
宏石荧光定量PCR仪SLAN-48P凭借稳定的性能、简便的操作流程和直观的软件界面，使实验人员能够在短时间内上手并掌握其使用方法。从准备到运行再到结果分析，整个实验链条清晰完整。通过快速上手指南的学习，操作者不仅能避免常见错误，还能高效完成检测任务，在临床诊断、科研探索和教学培训中获得准确可靠的数据。
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