宏石荧光定量PCR仪SLAN-48P用户指南
时间:2025-08-24

宏石荧光定量PCR仪SLAN-48P用户指南

一、产品总体认识

宏石荧光定量PCR仪SLAN-48P是一款中通量实时荧光定量检测平台,采用48孔标准反应格式,兼顾灵活性和检测效率,适合临床分子诊断、科学研究和教学培训等场景。仪器集成高精度温控模块、多通道荧光检测系统和智能化数据分析软件,能够支持多重靶标检测,并具备稳定性高、操作便捷、数据可靠的特点。
SLAN-48P的设计理念是“高效与精准并重”,既能满足小规模实验的快速检测需求,也能在科研中承担复杂的基因分析任务。


二、安装与准备

  1. 实验室环境要求

    • 放置于稳固、平整的实验台,避免震动。

    • 室温18–28℃,湿度40%–70%,环境应通风良好。

    • 避免阳光直射及强磁场干扰。

  2. 电源与接口

    • 使用稳压电源,电压范围符合设备说明。

    • 保证电源接地良好,避免瞬间电流冲击。

    • 检查USB或网络接口是否完好。

  3. 人员要求

    • 操作者需具备分子生物学基础知识,接受过相关培训。

    • 实验过程中应穿戴实验服、手套及防护眼镜。

  4. 耗材与试剂准备

    • 使用专用48孔反应板或兼容耗材。

    • 样品需经过标准化的核酸提取步骤,保证纯度。

    • 配置好的试剂应避免反复冻融,以确保扩增效果。


三、基本操作流程

  1. 开机与自检

    • 打开电源,仪器会自动运行自检程序,检测光学系统、温控模块和软件连接。

    • 界面若出现异常提示,需排查后再继续实验。

  2. 反应体系配置

    • 在无RNA/DNA酶环境下配置PCR体系。

    • 包括模板核酸、引物、探针或染料、缓冲液、Mg²⁺、dNTP及酶。

  3. 加样与密封

    • 每孔加入20–50 μL反应体系,避免气泡。

    • 使用透明封板膜或专用盖密封,防止蒸发与交叉污染。

  4. 放置样品板

    • 打开样品仓,放置48孔反应板。

    • 确认方向与定位标记正确,板体平稳。

  5. 设置程序

    • 在触控屏或电脑软件中输入循环条件与采集点。

    • 保存实验方案并核对无误。

  6. 运行实验

    • 点击“启动”,仪器自动执行温控循环与实时荧光采集。

    • 实时界面可查看曲线进展与温控状态。

  7. 实验结束

    • 程序完成后,仪器保存数据,用户可立即查看结果。

    • 取出反应板并处理废弃物。


四、实验程序设置

  1. 循环程序

    • 预变性:95℃,1–2 min。

    • 变性:95℃,15–30 s。

    • 退火/延伸:55–65℃,30–60 s。

    • 循环次数:35–45次,视实验需求而定。

  2. 荧光采集点

    • SYBR Green体系:通常在退火或延伸阶段采集。

    • TaqMan探针体系:多在延伸阶段采集。

  3. 熔解曲线

    • 升温范围:60–95℃。

    • 升温速率:0.3–0.5℃/步,实时记录荧光变化。

  4. 模板与方案保存

    • 可将常用循环程序保存为模板,供后续快速调用。

    • 软件支持不同用户方案独立保存。


五、数据与结果管理

  1. 扩增曲线

    • 实时显示Ct值与扩增动态。

    • 曲线应在指数期明显上升,反映扩增成功。

  2. 标准曲线与定量

    • 使用系列稀释标准品生成标准曲线。

    • 软件提供斜率、截距、相关系数与扩增效率参数。

  3. 熔解曲线分析

    • 单峰表明特异性良好,多峰提示非特异扩增。

    • 可用于基因分型与突变检测。

  4. 结果导出

    • 数据可导出为Excel、CSV、PDF、Word等格式。

    • 系统支持图表自动生成并生成实验报告。

  5. 数据安全

    • 软件提供权限分级与日志记录功能。

    • 建立定期数据备份,避免丢失。


六、注意事项

  1. 上样过程中应避免气泡和样品溢出。

  2. 每次实验必须包含阳性对照、阴性对照和无模板对照。

  3. 实验运行中不得随意开关样品仓。

  4. 样品板封膜必须紧密,避免蒸发。

  5. 结束后立即备份实验数据。


七、常见问题与解决

  1. 无扩增信号

    • 检查模板质量,确认程序参数正确。

    • 检查是否选择了正确荧光通道。

  2. 曲线异常

    • 可能由试剂降解或体系污染造成。

    • 建议更换试剂并重新配置。

  3. 重复间差异大

    • 检查移液器精度和加样操作。

    • 避免孔板边缘效应。

  4. 熔解曲线多峰

    • 优化退火温度,重新设计引物。

    • 使用探针体系提升特异性。

  5. 软件连接失败

    • 检查接口与驱动是否正常。

    • 尝试重启仪器与电脑。


八、维护与保养

  1. 日常维护

    • 使用后清洁仪器表面和样品仓。

    • 保持通风散热良好。

  2. 光学系统

    • 定期清理检测窗口,避免灰尘遮挡。

    • 若信号减弱,需进行光学校准或更换光源。

  3. 温控系统

    • 检查风扇是否运转正常。

    • 每年进行一次温度一致性校准。

  4. 软件与数据

    • 保持软件版本最新。

    • 定期建立数据多重备份。


九、安全规范

  1. 电源安全

    • 使用稳压电源,避免电压波动。

    • 实验结束后,先关机再切断电源。

  2. 样品安全

    • 废弃样品和耗材需按生物安全规范处理。

    • 防止核酸气溶胶污染实验室。

  3. 人员安全

    • 操作时必须穿戴防护用品。

    • 不得在运行过程中开启光学仓门。


十、应用价值

  1. 临床检测

    • 适用于病毒、细菌等病原体核酸检测。

    • 符合临床实验室标准化操作流程。

  2. 科研探索

    • 可用于基因表达研究、突变分析、拷贝数变异检测。

    • 支持多重实验与复杂数据分析

  3. 教学培训

    • 界面直观,曲线展示清晰,适合课堂演示。

    • 有助于培养学生对PCR原理和分子检测的理解。


总结

宏石荧光定量PCR仪SLAN-48P是一款兼顾精准性、灵活性与易用性的实时荧光定量PCR设备。通过科学的安装准备、规范的操作流程、合理的实验程序设置以及完善的数据管理,用户能够在临床、科研和教学中获得稳定可靠的结果。本用户指南提供了系统化的操作与管理参考,帮助用户在不同应用场景下发挥仪器的最大价值。


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