宏石荧光定量PCR仪SLAN-48P是一款48孔通量的实时荧光定量PCR设备，结合高精度温控模块与多通道光学检测系统，适用于临床诊断、科研实验和教学培训。该仪器体积适中，运行成本低，尤其适合中小规模样品检测和多批次实验。
主要功能包括：实时荧光检测、绝对定量与相对定量分析、熔解曲线分析、多重检测支持以及自动化数据处理。SLAN-48P兼顾精确性与灵活性，能够帮助用户高效完成从核酸扩增到结果解读的全过程。
实验环境
放置在平稳、无震动的实验台上。
室温18–28℃，湿度40%–70%。
避免阳光直射及强电磁干扰。
人员要求
操作者需掌握分子生物学基础并接受仪器操作培训。
穿戴实验服、手套和防护眼镜，避免污染。
耗材与试剂
使用兼容的48孔PCR反应板或专用管。
核酸模板需经过高质量提取与纯化。
使用新鲜配置的反应混合液，避免试剂反复冻融。
开机与自检
打开电源，仪器自动进行自检，包括光学模块、温控模块和通讯系统。
如有异常，软件界面会提示。
反应体系配置
在无核酸酶的工作区准备PCR反应体系。
体系成分包括模板、引物、探针或染料、缓冲液、Mg²⁺、dNTP和酶。
上样与封板
每孔加入20–50 μL反应体系。
使用专用透明封板膜封口，防止蒸发和污染。
样品装载
打开样品仓，放置48孔反应板。
确认方向与定位标识一致，保持平稳。
程序设定
在软件界面输入循环参数、荧光采集点和熔解曲线条件。
保存并检查设置是否正确。
实验运行
点击“启动”，系统开始温控与荧光采集。
实验过程中可实时查看曲线变化。
实验完成
仪器自动保存结果。
取出反应板并妥善处理。
循环程序
预变性：95℃ 1–2 min。
变性：95℃ 15–30 s。
退火/延伸：55–65℃ 30–60 s。
循环次数：35–45次。
荧光采集
SYBR Green体系：退火或延伸阶段采集。
TaqMan探针体系：延伸阶段采集。
熔解曲线
升温范围：60–95℃。
升温速率：0.3–0.5℃/步。
样品管理
软件支持手动录入与Excel批量导入。
样品布局直观可视化，避免混淆。
绝对定量
使用标准品建立曲线，计算未知样品拷贝数。
要求标准曲线R²≥0.99，扩增效率90–110%。
相对定量
以内参基因为校正，分析目标基因相对表达量。
常见内参基因如GAPDH、β-actin。
多重检测
通过多荧光通道同时检测多个靶基因。
设计时需避免荧光串扰。
熔解曲线分析
用于区分特异扩增与非特异扩增。
常用于基因分型与突变检测。
扩增曲线
Ct值反映模板浓度，Ct值越小代表浓度越高。
曲线应在指数期出现平滑上升。
标准曲线
根据系列稀释标准品绘制。
扩增效率在90–110%之间为理想范围。
熔解曲线
单一峰值代表特异性良好。
多峰提示可能存在引物二聚体或非特异扩增。
统计分析
软件支持ΔCt、ΔΔCt等计算。
提供均值、标准差和显著性检验功能。
上样时避免气泡产生，以免干扰光学检测。
每块板必须包含阳性对照、阴性对照与无模板对照。
反应体系应现配现用，避免长时间放置。
实验运行过程中不得随意开关样品仓。
数据需在实验结束后立即备份。
无扩增信号
检查模板质量与反应体系。
确认参数输入是否正确。
曲线异常
可能由试剂降解或污染引起。
建议更换试剂并重复实验。
重复性差
检查移液是否准确，孔板是否密封良好。
注意边缘效应，避免极端温差。
熔解曲线异常
优化退火温度或更换引物。
使用探针体系可提高特异性。
日常维护
实验后清洁仪器表面与样品仓。
保持通风散热顺畅。
光学系统
定期清理光学窗口。
若信号下降，需进行校准或更换光源。
检查风扇运转是否正常。
每年进行温度一致性校准。
软件与数据
定期更新软件。
建立多重备份机制，保证数据安全。
病原体核酸快速检测，适合小批量临床应用。
自动化报告生成，符合临床规范。
科研实验
适合多样化实验设计和探索性研究。
支持多重检测与复杂分析。
教学培训
操作简便，结果直观，适合课堂演示。
帮助学生掌握分子检测技术。
宏石荧光定量PCR仪SLAN-48P是一款功能完善、操作简便的实时荧光定量检测平台。通过科学的实验准备、规范的操作步骤、合理的系统设置和严格的数据分析，用户可以获得高效、准确和可靠的结果。该实验手册为临床、科研和教学提供了系统化的操作指导，帮助实验室实现标准化与高水平应用。
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