宏石荧光定量PCR仪SLAN-48P是一款中通量实时定量PCR检测系统，采用48孔标准设计，兼顾灵活性与高效性，适合临床分子诊断、科研实验和教学培训。该设备整合了高灵敏度光学检测模块、快速均一的温控系统及智能化软件平台，能够支持多重荧光检测，满足不同实验需求。相比96孔机型，SLAN-48P在小批量实验和教学演示中具有操作简便、运行成本低、环境要求相对宽松的特点。
其主要应用包括病原体核酸检测、基因表达定量、突变检测、遗传病筛查及药物基因学研究，是分子检测实验室的重要组成部分。
实验环境
设备应放置在稳固的实验台上，避免震动和强烈电磁干扰。
室温保持在18–28℃，相对湿度40%–70%。
确保良好通风，避免阳光直射。
耗材与试剂
兼容48孔专用反应板或适配管。
样品需经过高质量核酸提取，纯度和浓度适合PCR扩增。
使用新鲜配制的反应混合液，避免反复冻融。
人员准备
操作者需熟悉分子生物学基础，接受PCR原理与仪器培训。
全程穿戴实验服、手套，避免污染和操作失误。
打开电源开关，系统会自动运行硬件自检，包括光学模块、温控模块和通讯接口。
若存在异常，屏幕会显示提示，需排查后方可继续。
在无核酸酶环境中进行反应体系准备。
根据实验需求选择SYBR Green或TaqMan探针体系。
体系组分一般包括模板、引物、探针、dNTP、缓冲液、酶和水。
将配置好的体系加入反应板或反应管，每孔体积一般为20–50 μL。
使用透明密封膜或专用盖封板，避免蒸发与污染。
打开样品仓，按照定位标志正确放置48孔反应板。
确保板体平稳，不得倾斜或漏放。
在触控屏或连接的计算机上输入实验程序。
常见循环程序包括预变性、变性、退火和延伸阶段。
设置荧光采集点和熔解曲线参数。
点击“开始”运行实验，系统自动控制温度循环和荧光检测。
可实时监控扩增曲线和温控状态。
程序完成后，系统保存数据并生成初步结果。
取出反应板，妥善处理废弃物。
循环程序设置
预变性：95℃，1–2 min。
变性：95℃，15–30 s。
退火/延伸：55–65℃，30–60 s。
循环次数：35–45次，根据实验需求调整。
荧光采集设置
SYBR Green体系通常在退火或延伸阶段采集信号。
TaqMan探针体系可在延伸阶段采集，信号稳定。
熔解曲线设置
升温范围：60–95℃。
升温速率：每步0.3–0.5℃，实时记录荧光变化。
样品信息录入
输入样品编号、对照信息、标准品浓度。
系统支持批量导入，避免人工输入错误。
扩增曲线
判断样品是否扩增成功。
Ct值用于定量，Ct值越低说明模板浓度越高。
标准曲线与定量
用系列稀释的标准品建立曲线，计算未知样品浓度。
要求相关系数R²≥0.99，扩增效率90%–110%。
熔解曲线
单一峰代表特异性扩增。
多峰提示非特异性扩增或引物二聚体。
结果导出
数据可导出为Excel、PDF等格式，便于后续统计或报告。
系统支持图表与报表自动生成。
样品制备与上样过程中避免气溶胶污染。
实验板必须设置阳性对照、阴性对照和无模板对照。
实验运行中不得随意打开样品仓。
结束后立即导出数据并保存，避免数据丢失。
定期检查移液器精度，确保上样一致性。
无扩增信号
检查模板质量是否合格。
确认反应体系配比和程序设置是否正确。
扩增曲线异常
可能因试剂降解或污染导致。
建议更换试剂并重新配置。
重复间差异大
检查移液是否准确，反应体系是否充分混匀。
注意孔板排布避免边缘效应。
熔解曲线多峰
调整退火温度或重新设计引物。
使用探针体系可提升特异性。
日常维护
清洁外表与操作面板。
保持样品仓干燥，避免液体进入。
定期校准
使用标准荧光板和温度探针校正光学与温控系统。
每年至少一次请专业工程师巡检。
软件与数据
定期升级软件版本。
建立实验数据多重备份机制。
安全管理
使用稳压电源，避免电压波动。
严格执行实验室安全规程。
用于病原体核酸检测，满足快速诊断需求。
实验设计需符合临床质量标准。
科研实验
适合中小规模样品检测与方法学研究。
灵活的程序设计支持探索性实验。
教学培训
操作简便，结果直观，适合课堂演示和学生实训。
有助于培养学生对实时PCR技术的理解。
宏石荧光定量PCR仪SLAN-48P是一款中通量、操作简便且功能完善的实时定量PCR设备。通过规范的实验准备、正确的操作步骤、科学的参数设置和完善的维护机制，用户能够在临床、科研和教学等场景中高效使用本设备，获得准确可靠的数据。
本使用教程系统性地梳理了从实验准备到结果分析的全过程，可作为实验室培训、操作指导及教学资料的重要参考。
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