宏石荧光定量PCR仪SLAN-48P仪器操作

一、前言

随着分子诊断技术的快速发展，荧光定量PCR（Real-time PCR, qPCR）已成为科研、医学检验和药物研发领域不可或缺的工具。宏石SLAN系列产品因其稳定的性能和易用的界面，被广泛应用于各类实验室。SLAN-48P作为该系列中的中等通量型号，兼顾灵活性与高效性，既适合日常中小规模检测，也适用于教学与科研。

本文档作为SLAN-48P仪器操作指南，从结构认识、软件功能、操作步骤、数据解读到维护与常见问题，全面介绍该仪器的使用方法，帮助实验人员快速掌握操作技能。

二、仪器概述

1. 主要特点

• 48孔设计：适合中等规模检测，既满足临床需要，也便于教学实训；

• 多色检测：支持多个荧光通道，可同时进行多基因检测；

• 快速升降温系统：缩短反应时间，提高实验效率；

• 直观软件操作：提供实验模板、实时曲线、自动分析功能；

• 多格式导出：支持Excel、PDF等常见文件类型。

2. 应用范围

• 病原体核酸检测；

• 基因表达定量研究；

• 药物研发与药效学评估；

• 遗传病突变检测；

• 科研教学实验。

三、硬件结构

1. 热循环模块

• 提供精准的温度控制；

• 升降温速率快，确保PCR扩增效率。

2. 光学检测模块

• 多波长光源，支持多通道荧光信号采集；

• 高灵敏度探测器，确保低拷贝数模板的检测能力。

3. 样品仓

• 适配48孔反应板或条管；

• 配置方便，结构紧凑，适合多种实验设计。

4. 控制终端

• 内置操作界面，可独立运行实验；

• 也可连接外部电脑实现扩展功能。

四、软件界面介绍

1. 主界面

• 菜单栏：新建实验、打开实验、数据管理、工具设置；

• 工具栏：快速启动功能，包括运行、暂停、导出；

• 显示区：显示实验方案设置、扩增曲线、Ct值结果；

• 状态区：实时显示运行进度、剩余时间。

2. 功能模块

• 实验方案设定：输入实验名称、编号、操作者信息，编辑板型布局；

• 实时监控：显示扩增曲线随循环数的变化；

• 数据分析：Ct值计算、标准曲线拟合、熔解曲线分析；

• 报告生成：一键导出实验报告，支持图表与文字结合。

五、操作流程

1. 开机与检查

• 打开电源，检查仪器自检状态；

• 确认温控模块和光学模块正常；

• 清洁样品仓，确保无残留。

2. 实验设置

• 点击“新建实验”；

• 选择反应板布局并输入样本编号；

• 设定循环条件（变性、退火、延伸温度与时间）；

• 选择对应荧光通道。

3. 样本配置

• 提取核酸并配制反应体系；

• 将样品分装至48孔板，设置阴性、阳性对照；

• 密封并离心去气泡；

• 放入样品仓并关闭盖板。

4. 启动运行

• 点击“运行”，进入实时监控界面；

• 观察扩增曲线动态变化，确认实验进展顺利。

5. 实验结束

• 自动进入分析界面；

• 查看Ct值与熔解曲线；

• 生成并导出实验报告。

六、数据分析与结果解读

1. 扩增曲线

• 理想曲线应呈S型；

• 阴性对照无扩增，阳性对照Ct值在预期范围内。

2. Ct值分析

• Ct值越小，初始模板量越高；

• 差异显著时需结合标准曲线定量。

3. 标准曲线

• 使用已知浓度样品绘制；

• 斜率接近-3.3时说明扩增效率约为100%；

• R²≥0.99说明线性关系良好。

4. 熔解曲线

• 单峰提示特异性扩增；

• 多峰或拖尾表示存在非特异性扩增或引物二聚体。

七、应用案例

案例一：病毒核酸检测

• 目标：检测样品中是否存在特定病毒基因；

• 步骤：设置阴阳性对照，运行SLAN-48P；

• 结果：阳性样本Ct值小于阈值，阴性对照无信号。

案例二：基因表达差异分析

• 目标：比较处理组与对照组基因表达量；

• 步骤：选择内参基因，利用ΔΔCt法计算；

• 结果：通过柱状图展示表达量差异。

案例三：引物特异性验证

• 目标：验证新设计引物的扩增特异性；

• 步骤：运行反应并查看熔解曲线；

• 结果：熔解峰单一说明扩增结果可靠。

八、常见问题与排查

1. 无扩增信号

• 检查模板浓度是否过低；

• 确认通道设置正确。

1. Ct值波动大

• 样品浓度不一致或移液误差；

• 反应体系是否充分混匀。

1. 熔解曲线异常

• 调整退火温度；

• 优化引物设计。

1. 背景信号偏高

• 确认试剂无污染；

• 检查密封性与操作环境。

九、维护与保养

1. 日常清洁

• 每次实验结束后清理样品仓；

• 定期检查光学透镜。

1. 定期维护

• 每季度进行一次温控校准；

• 保持软件更新，保证数据兼容性。

1. 存储与环境

• 仪器应放置在干燥、无尘环境；

• 避免强光直射与剧烈震动。

十、安全规范

• 样本与对照需分区处理，避免交叉污染；

• 操作人员应穿戴实验防护用品；

• 生物样本需按规范处置，符合实验室安全要求。

十一、总结

SLAN-48P作为宏石荧光定量PCR系列中的重要型号，以其中等通量、灵活应用、操作便捷的特点，广泛适用于医学检验、科研实验与教学培训。通过本操作手册，用户可以全面掌握从开机准备、实验设置、样本上机、数据解读到维护保养的全过程。在严格执行操作规范的基础上，SLAN-48P将为核酸检测提供高效、可靠的技术支持。