宏石荧光定量PCR仪SLAN-48P应用指南手册
时间:2025-08-23

宏石荧光定量PCR仪SLAN-48P应用指南手册

一、引言

荧光定量PCR技术(Real-time PCR, qPCR)已成为分子生物学临床检测的核心工具之一。它能够在DNA扩增过程中实时监测荧光信号,从而实现定性和定量分析。宏石SLAN-48P作为宏石生命科学仪器系列中的一款中等通量机型,兼具高灵敏度与便捷性,适用于临床实验室、科研院所、食品检测机构及环境监测单位。与96孔机型相比,SLAN-48P在实验规模、运行速度和维护便利性方面更适合中小型实验室或专门检测项目的应用需求。


二、设备概述

1. 产品定位

SLAN-48P是一款48孔位实时荧光定量PCR仪,适合进行中等通量的核酸检测。它兼具高精度温控、灵敏光学检测和友好操作界面,适合多样化的实验场景。

2. 核心构成

  • 温控模块:基于半导体热循环系统,确保升降温均一。

  • 光学检测模块:配置多通道检测系统,兼容常用荧光染料。

  • 操作界面:配套软件简洁直观,支持快速建模与结果分析。

  • 样品仓:48孔布局,适合批量检测与灵活实验设计。


三、功能特点

1. 多通道检测

支持常见荧光通道(FAM、HEX/VIC、ROX、Cy5等),可实现多重反应,提升效率。

2. 温控精度

每个孔位温度偏差控制在±0.2℃以内,确保扩增结果一致性。

3. 灵活通量

单次最多48个样品,适合中等规模检测,兼顾效率与成本。

4. 数据分析自动化

软件自带Ct值计算、熔解曲线生成、标准曲线建立等功能,减少人工干预。

5. 安全合规

具备数据权限管理与实验日志追踪功能,符合医学检验实验室管理规范。


四、操作流程

1. 实验前准备

  • 确认实验环境温度18–28℃,湿度40%–70%。

  • 开机后检查仪器自检结果是否正常。

  • 准备反应耗材:48孔反应板、光学膜、滤芯枪头等。

2. 样品与反应体系配置

  • 提取并纯化DNA/RNA模板。

  • 根据实验方案配置主反应体系(如SYBR Green或TaqMan探针体系)。

  • 加入引物、探针、核酸模板及反应缓冲液。

3. 加样与封板

  • 在洁净工作台操作,避免气溶胶污染。

  • 均匀加入反应液,封板确保无气泡。

4. 实验设置

  • 新建实验文件,录入样本信息。

  • 设定PCR循环参数(预变性、变性、退火、延伸)。

  • 选择荧光采集模式及通道。

5. 启动运行

  • 将样品放入48孔样品仓。

  • 关闭舱盖,启动程序。

  • 软件实时显示扩增曲线与荧光信号。

6. 实验结束与结果保存

  • 实验完成后,导出数据(Excel、PDF等格式)。

  • 保存原始文件,便于追溯与对比。


五、应用领域

1. 医学检测

  • 病原体检测:新冠病毒、乙肝病毒、结核分枝杆菌等核酸检测。

  • 肿瘤分子诊断:检测基因突变、融合基因或循环DNA。

  • 遗传病检测:如地中海贫血基因携带者筛查。

2. 科学研究

  • 基因表达分析:利用相对定量方法(ΔΔCt)研究基因调控。

  • 基因功能研究:结合敲除或过表达实验,分析分子机制。

  • 药物研究:评估药物处理对基因表达或病原载量的影响。

3. 食品与农业检测

  • 检测转基因食品成分。

  • 检测食源性病原体,如沙门氏菌、大肠杆菌。

  • 监测农作物病原体。

4. 环境监测

  • 水源检测:分析水体中有害细菌和病毒。

  • 空气与土壤病原体监测:辅助公共卫生防控。


六、数据分析与解读

1. 扩增曲线

正常扩增曲线应呈S型,指数阶段Ct值最具参考意义。

2. 熔解曲线

SYBR Green体系中,通过熔解峰判断扩增特异性。单一峰代表特异性好,多峰提示非特异性扩增。

3. 定量分析

  • 绝对定量:基于标准曲线计算拷贝数。

  • 相对定量:以内参基因为标准,比较样本间差异。

4. 报告生成

软件可一键生成实验报告,包含扩增曲线、熔解曲线、Ct值表格及统计图表。


七、常见问题与解决办法

  1. 荧光信号弱

  • 检查光学膜是否贴合。

  • 确认试剂未过期,模板浓度是否合适。

  1. 熔解曲线多峰

  • 调整退火温度,优化引物设计。

  • 检查是否存在引物二聚体。

  1. 扩增失败

  • 确认温控模块正常运行。

  • 检查反应体系配置是否正确。

  1. 数据偏差大

  • 避免移液误差,使用滤芯枪头。

  • 检查内参基因稳定性。


八、维护与保养

  • 每日运行前:检查样品仓是否清洁。

  • 每周:擦拭光学窗口,保持透光性。

  • 每月:运行标准样品,验证系统稳定性。

  • 每年:联系厂家进行专业维护和校准。


九、未来发展与应用前景

随着精准医学与智慧实验室的发展,SLAN-48P未来将在以下方面进一步优化:

  • 智能化分析:结合AI判读扩增曲线。

  • 远程化管理:实验数据可通过云端实时共享。

  • 自动化集成:与样品制备和数据分析平台对接,形成全自动检测流程。

  • 绿色节能:降低能耗,减少耗材浪费。


十、总结

宏石荧光定量PCR仪SLAN-48P以其中通量、高灵敏度和易操作的特征,成为中小型实验室和特定检测项目的理想选择。它不仅具备实时荧光检测、熔解曲线分析、多重检测和定量分析等核心功能,还提供人性化的软件支持和合规的数据管理。通过科学的使用与定期维护,用户能够最大化发挥SLAN-48P的性能,为科研、临床、食品和环境监测提供可靠的数据支持。


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