宏石荧光定量PCR仪SLAN-48P是一款中等通量的实时荧光定量PCR系统,兼顾科研实验与临床检测需求。其设计重点在于灵活性、易操作性和高稳定性,能够满足常规核酸检测、基因表达分析及病原体筛查等多样化应用。与96通量型号相比,SLAN-48P更适合中小规模实验室,尤其在样品量有限或实验需求相对灵活的场景中表现突出。
系统设置是保证SLAN-48P正常运行与实验成功的关键步骤。本文将对SLAN-48P的系统设置进行全方位介绍,从硬件配置到软件设定、从实验参数调整到数据输出,形成完整的操作与优化指南。
在设置前,需充分理解设备的基本构成:
温控模块
48孔设计,兼容0.2 mL PCR管或专用反应板。
控温范围通常在4–99℃,升降温速率2–4℃/秒。
孔间温差小于±0.3℃,保证扩增均一性。
光学检测模块
支持多通道荧光检测,常见为FAM、HEX/VIC、ROX、Cy5。
LED光源稳定耐用,检测灵敏度高。
每个孔可独立采集荧光信号,适合单重或多重检测。
操作终端
安全与维护结构
样品仓具备热保护设计,防止意外烫伤。
光学通道密封,减少灰尘与湿气干扰。
电源与自检
开机后系统会自动运行自检程序,包括温控与光学检测模块。
若出现异常提示,应先排查电源、电缆和耗材。
时间与日期设置
在软件主界面设置正确的时间与日期,保证实验数据可追溯。
用户账户管理
系统支持多账户模式,可设置管理员与普通用户。
不同用户可分配不同权限,避免误操作。
主界面组成
实验设置区:用于设定程序、选择荧光通道。
实时监控区:显示扩增曲线与荧光信号强度。
数据分析区:进行Ct值计算、曲线分析和结果判定。
实验模板建立
可创建实验模板,保存常用的循环程序与检测通道。
模板化设置可减少重复操作,提升效率。
循环程序设置
预变性:一般为95℃,2–3分钟。
扩增循环:包括变性(95℃,10–15秒)、退火/延伸(55–60℃,30秒)。
循环次数:通常为40–45个循环。
用户可通过梯度功能优化退火温度。
荧光通道选择
根据染料种类选择通道,避免荧光重叠。
可同时启用多个通道实现多重检测。
样品布局
软件支持手动或批量导入样品信息。
可设定样品名称、编号、靶标基因、内参基因。
对照设置
阴性对照:检查体系污染。
阳性对照:验证体系有效性。
内参基因:校正样品量差异。
板图编辑
在界面中直观显示每个孔的设定,避免操作错误。
支持颜色区分不同分组,提升可视化效果。
实时监控
软件能实时显示扩增曲线。
若曲线基线波动过大,应检查加样或封板是否存在问题。
暂停与继续
系统支持在必要时中断实验,但不建议频繁操作,以免影响结果。
报警提示
温度异常、光学信号过弱时会提示报警。
用户应根据提示及时检查耗材与样品。
阈值与基线
自动计算Ct值时,系统会设置默认阈值。
对于特殊实验,可手动调整基线和阈值。
结果分析方式
绝对定量:通过标准曲线计算初始拷贝数。
相对定量:使用内参基因进行标准化。
熔解曲线:判断产物特异性。
报告生成
系统支持生成Excel或PDF格式报告。
报告包含扩增曲线、熔解曲线、Ct值表格、实验参数。
用户可将数据保存到本地或实验室服务器。
建议分类保存,建立实验数据归档体系。
Ct值波动大
检查加样是否均一,确认移液操作准确。
样品浓度不稳定时,应优化提取步骤。
熔解曲线异常
引物设计不合理,建议重新设计。
Mg²⁺浓度过高或退火温度过低,容易产生非特异性扩增。
通道干扰
若多重检测出现荧光重叠,应更换不同光谱范围的探针。
数据导出失败
检查U盘或网络连接状态。
软件异常时重启并重新导出。
软件维护
定期升级至最新版本,获得更强的数据处理能力。
备份实验模板与数据,防止因更新丢失。
温控校准
定期对温度模块进行校准,避免孔间差异。
光学系统清洁
保持光学通道洁净,减少信号干扰。
用户权限管理
管理员需定期检查用户权限设置,保证系统安全。
SLAN-48P荧光定量PCR仪的系统设置贯穿实验全流程,从硬件初始化到软件模板建立,从样品配置到数据分析,环环相扣。只有通过合理的系统设置,才能发挥设备最大性能,保证实验数据真实可靠。
重点技巧包括:
模板化管理:提升效率,避免重复操作;
对照体系完善:确保实验数据具备可解释性;
参数灵活调整:结合实际优化退火温度与阈值;
数据科学管理:标准化归档,便于追溯与比对。
SLAN-48P以其合理的通量与灵活的软件系统,能够帮助实验室实现高效、可靠的核酸检测。通过科学的系统设置,实验人员不仅能保证日常工作稳定运行,还能在科研与临床应用中获得高水平的检测数据。
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