宏石荧光定量PCR仪SLAN-96R是一款基于实时荧光检测技术的高性能核酸扩增与定量分析设备,采用96孔标准样品盘结构,适合临床诊断、科学研究及教学培训。该仪器集高精度温控、灵敏荧光检测、智能化分析软件于一体,能够实现病原体检测、基因表达分析、基因分型及突变筛查等多种功能。
SLAN-96R设计兼顾高通量与灵活性,既能满足临床批量检测,也能支持科研探索中的个性化实验方案,是分子实验室的核心设备之一。
环境准备
仪器应放置在平稳台面,避免震动。
室温保持在18–28℃,湿度控制在40%–70%。
避免阳光直射和强磁场干扰。
耗材与试剂
使用标准96孔PCR反应板或适配管。
样品需经过高质量核酸提取,保证纯度。
配制反应体系时使用无核酸酶水。
人员准备
操作者需接受培训,熟悉PCR原理与操作规程。
穿戴实验服、手套,避免污染。
开机与自检
打开电源开关,系统自动运行自检程序。
若发现异常,界面会提示相应信息。
反应体系配置
在无核酸酶工作台中配置体系。
根据实验需求选择SYBR Green或TaqMan探针体系。
上样
将配置好的反应体系加入96孔板,每孔体积通常为10–50 μL。
封板膜要压紧,避免蒸发或交叉污染。
放置样品板
打开样品仓,放置96孔板。
确认孔板方向与定位标记一致。
设置实验程序
通过触控屏或外接计算机输入实验参数。
包括循环程序、荧光采集点、熔解曲线等。
运行实验
点击“开始”,系统进入扩增程序。
实验过程可实时监控荧光信号。
实验结束
程序完成后,系统自动保存结果。
取出样品板并妥善处理。
循环程序
预变性:95℃,1–2 min。
变性:95℃,15–30 s。
退火/延伸:55–65℃,30–60 s。
循环次数:35–45次。
荧光采集
SYBR Green体系:退火或延伸阶段采集。
TaqMan体系:延伸阶段采集。
熔解曲线
60–95℃逐步升温,每步0.3–0.5℃,实时记录荧光。
用于检测非特异性扩增和引物二聚体。
样品信息
输入样品编号、对照、标准品信息。
系统支持批量导入Excel表格。
扩增曲线
通过Ct值判断目标基因的存在与丰度。
曲线应平滑并在指数期出现明显上升。
标准曲线
用于绝对定量分析。
相关系数R²应大于0.99,扩增效率在90%–110%之间。
熔解曲线
单一峰表示扩增特异性良好。
多峰提示存在非特异性产物。
统计学分析
相对定量实验需进行ΔCt或ΔΔCt分析。
数据需结合重复实验进行验证。
样品制备阶段要防止交叉污染。
上样时避免气泡,以免影响光学检测。
每块板必须设置阳性、阴性和无模板对照。
实验过程中不得随意开关样品仓。
实验结束后立即导出数据备份。
无扩增曲线
检查模板质量与体系配置。
确认程序参数输入正确。
曲线不规则
可能由样品污染或试剂失效导致。
建议重新制备体系。
重复间差异大
检查移液操作是否规范。
确认孔板是否密封良好。
熔解曲线异常
优化退火温度。
重新设计引物。
日常维护
清洁仪器表面,保持通风。
定期检查光学窗口,避免灰尘污染。
定期校准
使用标准荧光板校准光学系统。
使用温度探针验证加热模块均一性。
软件升级
保持系统软件最新版本。
升级前做好数据备份。
数据安全
建立多重备份机制,防止实验数据丢失。
管理员应定期清理和检查用户账户。
多用于病原体核酸检测,如病毒、细菌感染的快速诊断。
要求严格的对照体系与标准化操作。
科研研究
适合基因表达分析、突变检测、药物反应研究。
实验设计灵活,数据分析需结合统计学工具。
教学培训
用于展示实时荧光定量扩增过程。
设计简化的教学实验方案,提高直观性。
宏石荧光定量PCR仪SLAN-96R作为一款专业分子检测设备,其使用说明涵盖了从实验准备到数据分析的全流程。科学、规范的操作不仅能保障实验结果的准确性,还能延长设备寿命,减少故障率。无论是在临床诊断、科研探索还是教学培训中,SLAN-96R都能通过规范的使用方式发挥其最大价值。
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