宏石荧光定量PCR仪SLAN-96R操作手册

一、前言

荧光定量PCR技术（qPCR）是现代分子生物学和医学检测的重要工具。通过实时监控扩增反应中的荧光信号，研究人员能够实现对核酸的快速定性与定量分析。宏石SLAN-96R作为一款高性能荧光定量PCR仪，不仅具备高灵敏度和高通量的特点，还配套直观的软件平台，帮助用户快速完成实验设置、运行与数据解读。

本操作手册旨在为用户提供一套系统化的参考，从仪器认识到实际应用，再到维护保养，帮助实验人员高效、准确地完成各类检测任务。

二、仪器概述

1. 主要功能

• 高通量检测：96孔反应体系，适合大规模实验；

• 多通道采集：支持多色荧光检测，满足多基因、多靶点实验需求；

• 实时曲线监测：软件自动生成扩增曲线与熔解曲线；

• 智能数据分析：Ct值判定、标准曲线计算、拷贝数定量；

• 多格式输出：支持Excel、PDF、Word等多种结果导出。

2. 适用范围

• 临床病原体核酸检测；

• 科研中的基因表达分析；

• 遗传学与转录组学研究；

• 药物研发与分子诊断培训。

三、硬件结构

1. 热循环系统

具备精确的温控能力，确保PCR反应高效进行。

2. 光学检测系统

采用高灵敏度光学模块，能同时捕获多色荧光信号。

3. 样品仓

支持标准96孔反应板或8联管，兼容性强。

4. 控制终端

内置计算机与触控屏，便于独立操作，也可连接外部电脑。

四、软件界面

1. 主界面布局

• 菜单栏：新建实验、数据管理、工具设置；

• 快捷栏：常用功能按钮，如启动实验、导入模板；

• 工作区：显示实验设计、扩增曲线或分析数据；

• 状态栏：运行进度、温度变化、剩余时间等。

2. 核心模块

• 实验编辑：设定循环条件、选择通道、输入样本编号；

• 实时监控：显示扩增曲线实时变化；

• 数据分析：计算Ct值、绘制标准曲线、输出结果表格；

• 报告生成：一键导出标准化实验报告。

五、实验操作步骤

1. 开机与准备

• 检查电源与连接状态；

• 打开主机与软件，确认仪器初始化完成；

• 检查温控与光学系统是否正常。

2. 实验设置

• 点击“新建实验”；

• 输入实验名称、编号与操作者信息；

• 在板型界面录入样本与对照信息；

• 设置反应循环条件（变性、退火、延伸）；

• 选择检测通道（如FAM、HEX、ROX等）。

3. 样品上机

• 配置反应体系，分装至96孔板或8联管；

• 设置阴性对照与阳性对照；

• 使用离心机短暂离心，去除气泡；

• 放入样品仓并关闭盖板。

4. 启动实验

• 点击“运行”；

• 软件实时显示荧光信号与扩增曲线；

• 实验完成后自动进入分析界面。

5. 数据分析

• 系统自动识别Ct值并生成结果表格；

• 查看扩增曲线是否符合标准S型；

• 绘制标准曲线，计算未知样本浓度；

• 分析熔解曲线，检查扩增特异性。

6. 报告生成与数据导出

• 根据需要选择Excel、PDF或Word格式；

• 报告包含实验条件、Ct值表、扩增与熔解曲线；

• 文件可存储至本地或导入实验室管理系统。

六、结果解读

1. Ct值判断
   Ct值越小，说明模板初始拷贝数越高；
   Ct值过大或无Ct值提示样本阴性或浓度过低。

2. 标准曲线
   斜率接近-3.3时，扩增效率约为100%；
   R²接近1说明线性关系良好。

3. 熔解曲线
   单峰为特异性扩增；
   多峰或拖尾表示存在非特异性产物或引物二聚体。

七、常见问题与解决方法

1. 无扩增曲线

• 检查模板和引物是否有效；

• 确认通道设置正确。

1. Ct值波动大

• 样品浓度差异或移液误差；

• 确认反应体系均一性。

1. 熔解曲线异常

• 需优化退火温度或重新设计引物；

• 检查试剂纯度。

1. 背景信号过高

• 检查是否存在污染；

• 调整阈值线位置。

八、日常维护

1. 开机维护

• 每次使用前确认样品仓清洁；

• 定期检查光学模块。

1. 关机维护

• 实验结束后清理反应板残留；

• 定期备份数据，保持软件更新。

1. 年度校准

• 建议每年进行一次温控与光学校准，确保实验精度。

九、安全与规范

• 实验前穿戴防护用品，避免核酸污染；

• 阴阳性样本需分区操作；

• 严格执行实验室生物安全规程；

• 数据需保存与备份，确保可追溯性。

十、附录：操作要点总结

1. 操作快捷：模板调用可简化重复实验；

2. 实时可控：扩增曲线实时显示，便于监控实验进程；

3. 分析全面：Ct值、标准曲线、熔解曲线一体化分析；

4. 结果可靠：系统自动生成报告，减少人为误差；

5. 管理规范：用户权限分级，确保实验安全性。

十一、结语

宏石荧光定量PCR仪SLAN-96R集成了高效的硬件与智能的软件平台，是科研与临床检测的重要工具。通过本操作手册，用户可以系统学习从开机准备、实验设置、样本上机、数据分析到结果报告的完整流程，并掌握常见问题排查与日常维护方法。在严格执行操作规程的前提下，SLAN-96R能够为各类核酸检测提供可靠保障，为分子检测的发展与应用贡献力量。