宏石荧光定量PCR仪 SLAN-96R 是一款高灵敏度、多通道的实时荧光定量 PCR 仪器，广泛应用于科研检测、临床诊断、食品安全与环境监测。为了保证实验结果的准确性和实验人员的安全，必须遵循统一的操作规范。本文档旨在提供系统的使用指南，从实验准备到实验结束的全过程进行详细说明，确保每一位操作人员能够熟练、安全地开展实验工作。
环境条件
温度：18–30℃，避免温度波动过大。
相对湿度：40–70%。
防尘、防潮，保持空气洁净。
区域划分
试剂准备区：配制反应体系。
样品处理区：进行核酸提取。
扩增检测区：放置 PCR 仪器并进行扩增反应。
各区域人员、耗材不得交叉，以降低污染风险。
人员要求
操作人员需经过专业培训，掌握 PCR 原理与 SLAN-96R 的使用流程。
实验过程中须穿戴实验服、手套、口罩，避免直接接触样本。
打开电源，确认自检程序正常。
检查热循环模块表面是否清洁无损。
光学系统窗口应无灰尘与指纹。
热盖温度预设 105℃ 左右，防止样品蒸发。
PCR 管、八联管或 96 孔板须为光学透明材质。
使用带滤芯移液枪头，避免气溶胶污染。
使用专用封板膜，确保密封性。
所用试剂必须在有效期内，严格按说明保存。
样本核酸提取需在专门区域完成，并避免反复冻融。
配制反应体系时，优先采用“主混液+模板”方式，最后加模板，减少污染。
根据实验方案设计，引物、探针、预混液比例严格准确。
设置阳性对照、阴性对照和标准品，确保实验可溯源。
体系混合均匀后，短暂离心，确保液滴集中管底。
在洁净台中进行，避免外部环境污染。
每次移液后更换枪头，防止交叉污染。
加样体积须符合实验要求，避免产生气泡。
打开热循环仪盖子，将 PCR 板正确放置。
确认板与热循环模块紧密贴合，避免温控不均。
通过软件设定程序，包括预变性、循环数、荧光采集点。
若需熔解曲线分析，应设置合适的升温范围。
启动实验后，系统将自动完成扩增与信号采集。
操作人员可实时监控扩增曲线，发现异常及时终止实验。
运行过程中避免触碰或移动设备。
Ct 值判定
阴性对照不得出现扩增曲线。
阳性对照 Ct 值应在合理范围内。
平行样本 Ct 值差异应小于 1。
标准曲线与效率
R² 值应大于 0.99，扩增效率在 90–110% 为合格。
标准品浓度梯度需准确配置。
熔解曲线分析
单一特异性产物应表现为单一峰。
若出现多个峰，需检查引物特异性或退火温度。
防止污染
严格遵循“单向操作”，避免样品与试剂回流。
阴性对照必须全程设立，用于监控污染。
温控细节
热循环模块需保证表面平整洁净。
热盖温度设置需高于反应体系约 10℃。
光学检测
不可用手直接触碰光学检测区域。
定期清洁光学通道窗口，避免灰尘干扰。
软件操作
程序设定须与实验设计一致，不可随意更改。
数据文件命名规范化，便于存档与追溯。
实验过程中接触的样品与耗材均视为潜在污染物，实验结束后应高压灭菌。
荧光染料避免直接接触皮肤和眼睛。
设备周边保持整洁，不得堆放杂物。
突发停电时，保持设备盖子关闭，待恢复供电后再评估实验是否需重做。
无扩增曲线
检查模板是否降解。
确认体系配置是否正确。
检查光学通道是否匹配。
Ct 值偏高
模板量不足或降解。
热循环条件不合适。
反应体系含有抑制物。
阴性对照扩增
存在气溶胶污染，应更换试剂并清洁环境。
重新校准操作区域。
熔解曲线异常
非特异性扩增，应优化退火温度或引物。
出现引物二聚体，可调整引物浓度。
日常维护
实验结束后，用无水乙醇擦拭热循环模块。
保持光学窗口清洁。
定期清除机身灰尘，确保通风口畅通。
定期保养
每 3–6 个月进行一次温度校准。
每年进行一次光学模块校准。
定期检查软件更新，保持系统兼容性。
存放与停机
长期停用时，关闭电源并覆盖防尘罩。
存放环境应干燥、无腐蚀性气体。
宏石荧光定量PCR仪 SLAN-96R 的使用规范涵盖了实验室环境要求、操作流程、数据分析、安全规范以及维护保养。遵循统一规范不仅能保证实验结果的准确性和重复性，也能延长设备使用寿命，降低实验风险。
在实际工作中，实验人员应养成良好的实验习惯，从试剂准备到数据解读全程严格控制细节。同时，实验室管理者应定期组织培训，确保操作团队对规范内容熟悉并执行到位。只有在制度化与标准化的保障下，SLAN-96R 才能发挥出最大的科研与临床应用价值。
黑马仪器网 浙江栢塑信息技术有限公司
