宏石荧光定量PCR仪SLAN-96R是一款高性能的核酸扩增与实时荧光检测设备,广泛应用于医学检验、分子生物学研究、疾病诊断、基因检测等领域。其核心功能是通过荧光信号实时监控PCR反应过程,实现目标基因的定性与定量分析。
SLAN-96R配备高灵敏度光学系统与精密温控模块,支持多种荧光通道检测,能够兼容多样化的荧光染料和探针体系。同时,仪器配套的软件提供强大的数据处理功能,包括标准曲线分析、熔解曲线绘制、Ct值计算、相对与绝对定量结果输出等。
在使用SLAN-96R之前,需要对实验环境和设备安装进行规范准备。
环境要求
温度:18–30℃,湿度:30%–80%。
避免阳光直射及强磁场干扰。
保持实验室空气洁净,防止灰尘进入光学系统。
电源条件
电源电压:220V±10%,频率50Hz。
独立稳压电源,避免大功率设备共用。
建议配备UPS,防止实验中断。
安装步骤
将仪器放置在稳固台面,确保平整无震动。
接通电源线与通信线缆(如USB/网线)。
打开主机电源开关,确认软件和仪器连接正常。
在进行荧光定量PCR实验之前,需要做好样品与耗材的准备。
耗材准备
专用96孔反应板或八联管。
光学透明封板膜或盖子。
无核酸酶污染的枪头和离心管。
试剂准备
荧光定量PCR预混液(含Taq酶、dNTP、缓冲液)。
上游与下游引物。
探针或荧光染料(如SYBR Green)。
模板DNA或RNA(需经反转录)。
样品配置
根据实验方案配制反应体系,常见体系为20µL或25µL。
设置阴性对照(NTC)与阳性对照,确保实验可靠性。
使用离心机短暂离心,去除气泡。
开机与软件启动
打开电源,进入主界面。
启动配套软件,选择“新建实验”。
程序设定
输入实验名称与保存路径。
设置循环参数:预变性、变性、退火、延伸温度与时间。
设置荧光采集点(通常在退火或延伸阶段)。
样品布局
在软件界面建立样品板布局,定义孔位对应的样品或对照。
指定荧光通道与检测染料。
样品装载
将反应板放入仪器,确保放置方向正确。
关闭反应仓盖,确认密封性良好。
运行与监控
点击“开始运行”,仪器自动完成加热循环与荧光采集。
软件实时显示扩增曲线,便于监控反应状态。
实验完成后,需对荧光信号进行分析。
扩增曲线
查看对照组扩增曲线,确认无污染或异常扩增。
样品Ct值在合理范围内,曲线呈指数增长。
标准曲线
通过已知浓度标准品绘制标准曲线。
计算PCR效率,理想范围为90%–110%。
熔解曲线分析
检测产物特异性,避免非特异性扩增或引物二聚体干扰。
单一峰值表明扩增产物特异。
结果导出
软件支持导出Ct值表格、扩增曲线图、熔解曲线图。
可生成PDF或Excel格式报告,便于后续统计与归档。
Ct值偏高或未检测到信号
检查样品浓度是否过低。
确认引物设计是否合理。
排查反应体系配置错误。
熔解曲线出现多个峰
可能存在非特异性扩增。
适当提高退火温度或优化引物。
重复性差
确保加样一致性,避免气泡。
样品与试剂充分混匀。
软件连接异常
检查USB/网线连接。
重启仪器与电脑,再次尝试连接。
日常维护
每次实验后清理样品仓,避免残留液体腐蚀。
定期擦拭光学窗口,使用无水乙醇清洁。
校准与检测
按照厂家要求定期进行温控与光学校准。
检查荧光通道灵敏度,确保检测准确。
存储与停机
长期不用时,断开电源,覆盖防尘布。
存放环境应干燥通风,避免潮湿。
SLAN-96R不仅适用于常规的基因扩增检测,还可广泛应用于:
病原体快速检测(如新冠、流感、结核等)。
肿瘤基因突变分析。
遗传病筛查与基因分型。
药物代谢基因检测与个体化用药指导。
宏石荧光定量PCR仪SLAN-96R凭借其精准的温控系统、灵敏的荧光检测和便捷的软件操作,已成为分子诊断和科研实验室的核心设备之一。规范操作与合理维护是确保实验结果可靠性的关键。通过本教程,实验人员可以系统掌握该仪器的使用流程,从而在科研与临床检测中发挥其最大效能。
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