宏石荧光定量PCR仪SLAN-96R运行规范

一、设备简介

宏石荧光定量PCR仪SLAN-96R是一款应用广泛的实时定量PCR仪器，主要用于分子生物学、医学检验、疾病监测、食品安全和环境监测等领域。其核心功能是通过荧光信号监测扩增产物的累积，从而实现对DNA或RNA的实时定量分析。

该型号PCR仪具有以下主要特点：

1. 高通量：96孔设计，适合大批量样本的同时检测。

2. 高灵敏度：能够检测低拷贝数的核酸分子，确保实验结果的准确性。

3. 多通道检测：配备多个荧光检测通道，支持多重扩增实验。

4. 温控精确：采用先进的半导体制冷和温控系统，保证循环反应的稳定性。

5. 操作智能化：配备友好的人机交互界面和数据分析软件，简化了实验流程。

二、运行前准备

在正式运行前，需对实验环境、试剂和样品、设备状态进行全面检查。

1. 实验环境要求

• 实验室应保持清洁、安静、温度适宜（18–28℃）。

• 避免阳光直射和强电磁干扰。

• 保持空气流通，但要防止灰尘和气溶胶污染。

2. 试剂与样品准备

• 预先配制反应体系，包括引物、探针、缓冲液、dNTP、酶等。

• 样品需经过标准化的核酸提取流程，确保纯度和浓度符合要求。

• 各类试剂应根据说明书保存于合适温度，避免反复冻融。

3. 仪器准备

• 开机前检查电源和接地是否良好。

• 检查热循环模块是否干净，避免残留物影响导热。

• 检查光学通道及滤光片是否清洁。

• 确认仪器软件和数据库正常运行。

三、操作步骤

1. 开机与自检

• 打开电源，等待系统完成自检。

• 检查温控系统、光学模块、机械部件的状态。

• 若发现异常，需暂停操作并联系工程师。

2. 反应板或反应管装载

• 将反应体系准确加入到96孔板或专用管中。

• 使用透明封板膜封口，避免气泡和蒸发。

• 装载时保持平稳，避免震动导致样本溅出。

3. 运行程序设置

• 通过软件输入扩增程序参数，包括变性、退火、延伸温度及循环次数。

• 设置荧光通道，选择SYBR Green、FAM、HEX、ROX等适配通道。

• 输入样品信息、试剂批号和检测项目，便于结果追溯。

4. 启动运行

• 点击“运行”按钮，仪器开始自动循环反应。

• 过程中软件实时记录荧光数据。

四、运行过程管理

1. 温度控制

• 确保加热和冷却速率符合预设要求。

• 避免因环境温度波动导致循环异常。

2. 荧光监测

• 仪器在每一循环的延伸末期或退火阶段进行荧光采集。

• 多重通道应避免信号干扰，确保光学系统正常。

3. 软件监控

• 实时查看扩增曲线，关注是否有非特异性扩增或异常信号。

• 若出现异常放大曲线，应及时记录并分析。

五、结果解读

1. 扩增曲线

• 标准的指数扩增曲线应呈现“S”型。

• 若基线漂移或曲线异常，需排查实验条件。

2. Ct值分析

• Ct值越小，样本中核酸浓度越高。

• 对照组应设置阳性对照、阴性对照和无模板对照。

3. 定量分析

• 使用标准曲线法或ΔΔCt方法计算相对定量。

• 软件自动生成结果表格和图形报告。

六、维护与保养

1. 日常维护

• 每次实验结束后，擦拭热循环模块表面。

• 定期清洁光学检测通道，避免灰尘影响。

• 检查风扇与散热口，保持通风良好。

2. 定期维护

• 每季度检查温度校准。

• 每半年进行光学校准。

• 必要时联系厂家工程师进行专业维护。

七、常见问题与解决方法

1. 扩增曲线不正常

• 检查引物设计是否合理。

• 确认模板质量是否达标。

2. 荧光信号过弱

• 检查探针浓度和有效性。

• 确认光学通道是否干净。

3. 样本污染

• 确认实验分区操作是否严格。

• 加强无模板对照监控。

八、实验室安全规范

• 严格遵循分区操作：试剂准备区、样本处理区、扩增区、产物分析区分开。

• 穿戴实验室防护用品，包括实验服、手套和护目镜。

• 避免核酸扩增产物污染实验环境。

• 废弃物应分类处理，高压灭菌后再丢弃。

九、总结

宏石荧光定量PCR仪SLAN-96R运行规范涵盖了从实验准备、样品装载、程序运行、结果解读到维护保养的全过程。严格执行这些规范，不仅能确保实验结果的准确性与可重复性，也能延长设备使用寿命，保障实验室安全。

该PCR仪以其高通量、多通道和高灵敏度的特点，为科研、医学与检验提供了强有力的技术支撑。只有在运行中严格遵守规范，才能充分发挥其性能优势。