自动核酸提取仪怎么使用
自动核酸提取仪的使用方法
自动核酸提取仪通过高度自动化的流程简化核酸提取操作，以下是具体的使用步骤和注意事项，帮助您高效操作仪器。
一、实验前准备
1. 样品准备
根据实验需求选择样品类型（如血液、组织、唾液等）。
按试剂盒说明进行样品裂解：
将样品与裂解液混匀，静置或加热处理以释放核酸。
确保样品中无大颗粒杂质，如未溶解的组织块，可离心去除沉淀。
2. 准备试剂与耗材
试剂：
准备试剂盒中所需的结合液、洗涤液、洗脱液和磁珠悬液。
耗材：
使用配套的一次性样品管、96孔板、磁棒套，确保无污染。
3. 仪器检查
检查磁棒套是否安装正确，无裂痕或污染。
核实样品托盘位置是否到位，磁棒是否运行顺畅。
确保仪器已清洁，液体通路畅通，无残留试剂。
二、样品装载与设备设置
1. 装载样品与试剂
按以下步骤装载：
将裂解处理后的样品加入样品槽或孔板。
依次加入结合液、磁珠悬液、洗涤液和洗脱液，按照试剂盒说明添加。
样品槽或孔板放入仪器托盘，确保每个槽位对齐。
2. 设置提取程序
在设备触摸屏或软件界面，选择适合样品类型的提取程序（如DNA提取、RNA提取）。
确认以下参数设置：
裂解温度：如65℃（根据试剂要求）。
洗脱温度：如50℃。
运行模式：标准提取或自定义模式。
保存设置并确认。
3. 启动设备
检查所有耗材是否正确放置。
点击启动按钮，仪器自动运行提取流程。
三、提取流程监控
仪器将依次完成以下操作：
样品裂解：
裂解液作用下，细胞破裂释放核酸。
核酸吸附：
磁珠与核酸结合，形成稳定复合物。
磁场分离：
磁棒固定磁珠，将上清液中的杂质去除。
洗涤：
洗涤液清除磁珠表面残留的蛋白质、脂类。
洗脱：
洗脱液将核酸从磁珠中释放，获得高纯度核酸。
仪器会自动完成上述步骤，无需人工干预。
四、提取后处理
1. 核酸回收
提取完成后，仪器将洗脱液中的核酸集中于指定的试管或孔位。
使用无RNase/DNase的移液器，转移核酸溶液至洁净储存管中。
2. 核酸浓度检测
使用分光光度计（如Nanodrop）或荧光定量仪检测核酸浓度和纯度：
A260/A280值通常在1.8-2.0为合格。
3. 样品存储
核酸溶液可短期存储于4℃，长期存储需置于-20℃或-80℃。
五、仪器清洁与维护
1. 清洁仪器
取下磁棒套、样品托盘，用无RNase、无DNase的清洗液或蒸馏水清洁。
清空废液槽并冲洗干净。
2. UV消毒
启动UV消毒程序，运行10-15分钟，清除仪器内潜在污染。
3. 检查耗材与部件
确保磁棒套无裂痕或残留液体，必要时更换。
定期检查管路和液泵是否通畅。
注意事项
样品操作
在生物安全柜中处理高风险样品，避免交叉污染。
使用无菌耗材和试剂，防止核酸降解。
程序设置
根据不同样品类型选择正确提取程序。
温控参数需符合试剂说明书要求。
定期校准
检查设备磁棒的磁场强度和温控模块的准确性，确保运行稳定。
废液处理
提取过程中产生的废液应按照生物安全废弃物的规定处置。
常见问题及解决办法
| 问题 | 可能原因 | 解决办法 |
|---|---|---|
| 核酸提取浓度过低 | 裂解不充分、试剂量不足 | 增加裂解时间或调整试剂用量 |
| 提取核酸纯度不高 | 洗涤不充分 | 增加洗涤次数或优化洗涤液配方 |
| 仪器运行中断 | 样品托盘未放置正确、耗材错误 | 检查托盘位置，确认使用正确耗材 |
| 样品交叉污染 | 样品处理不规范或未清洁磁棒套 | 严格按照规范操作，使用一次性耗材 |
| 温控不稳定 | 温控模块校准错误或老化 | 联系厂家维修或重新校准设备 |
总结
自动核酸提取仪通过高度自动化的流程，大幅简化了核酸提取操作步骤。按照规范进行样品装载、程序设置、提取流程监控及后续清洁维护，可确保设备运行稳定，获得高质量的核酸样品，为下游实验提供可靠支持。
