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蛋白质纯化系统有哪些

蛋白质纯化系统根据应用需求分为实验室级、中试级和工业级,涵盖多种分离技术,能够满足基础研究、生物制药和工业生产的需求。常见品牌如GE Healthcare的ÄKTA系列、Bio-Rad的NGC系统和Thermo Fisher的ProPac系统,提供了灵活、高效的解决方案。选择合适的系统需综合考虑实验规模、目标蛋白特性和预算等因素,以确保实验效率和纯化效果。

蛋白质纯化系统种类与常用品牌

蛋白质纯化系统根据应用场景、分离技术和规模可分为实验室级、小规模工业生产级和大规模工业级系统。这些系统结合多种分离技术(如亲和层析、离子交换、凝胶过滤等),广泛应用于基础研究、生物制药和工业酶生产。

以下是蛋白质纯化系统的主要类型及常见品牌。


一、蛋白质纯化系统的分类

1. 按应用场景分类

  1. 实验室级蛋白质纯化系统

    • 用于基础研究和小规模蛋白纯化。

    • 特点:模块化、灵活性高,适合多种分离需求。

    • 示例:ÄKTA pure、Bio-Rad NGC系统。

  2. 小规模工业生产级

    • 用于中试规模或临床前研究的蛋白生产。

    • 特点:处理量较大,支持自动化操作

    • 示例:ÄKTA avant、Sartorius工业级系统。

  3. 大规模工业级

    • 用于大规模生物药物和工业酶生产。

    • 特点:高通量、高效率,支持批量生产。

    • 示例:GE Healthcare ÄKTAprocess、Thermo Fisher工业层析系统。


2. 按分离技术分类

  1. 亲和层析系统

    • 原理:利用蛋白质与配体的特异性结合(如His标签蛋白与Ni²⁺结合)。

    • 用途:用于抗体、His标签重组蛋白的高特异性纯化。

    • 示例:HisTrap和Protein A层析柱配套的系统。

  2. 离子交换层析系统

    • 原理:基于蛋白质电荷差异,通过离子交换树脂分离。

    • 用途:用于分离不同pI值的蛋白质。

    • 示例:HiTrap IEX层析柱配套的系统。

  3. 凝胶过滤层析系统

    • 原理:按分子量大小分离蛋白,较大分子先流出。

    • 用途:用于分离蛋白质聚合物、降解产物或复合物。

    • 示例:Superdex系列凝胶过滤柱配套的系统。

  4. 疏水作用层析系统

    • 原理:基于蛋白表面疏水性差异,通过疏水树脂分离。

    • 用途:分离疏水性较强的蛋白。

    • 示例:Phenyl Sepharose柱配套的系统。

  5. 多功能系统

    • 特点:支持多种分离技术,适合复杂样品的综合纯化。

    • 示例:ÄKTA pure、Bio-Rad NGC系统。


二、常见蛋白质纯化系统品牌及设备

1. GE Healthcare (Cytiva)

  1. ÄKTA pure

    • 特点:实验室级,模块化设计,适合多种分离模式。

    • 应用:从小规模实验到中试规模的蛋白质纯化。

  2. ÄKTA avant

    • 特点:适用于中试级别,支持高通量处理和自动化操作。

    • 应用:生物药物的中试规模生产。

  3. ÄKTAprocess

    • 特点:工业级系统,支持大规模生产。

    • 应用:适用于生物制药和工业酶生产。


2. Bio-Rad

  1. NGC系统

    • 特点:实验室级纯化系统,灵活性强,模块化设计。

    • 应用:适用于小型实验室的多种分离模式。

  2. BioLogic DuoFlow

    • 特点:双泵设计,支持复杂梯度分离。

    • 应用:蛋白质和多肽的高分辨率纯化。


3. Thermo Fisher Scientific

  1. ProPac系统

    • 特点高灵敏度,适合高分辨率的蛋白质纯化。

    • 应用:分析性分离和制备性分离。

  2. Dionex系统

    • 特点:适合蛋白质组学研究,支持在线分析和高效分离

  3. 工业层析系统

    • 特点:适合生物药物的大规模生产,支持CIP(清洁原位)操作。

    • 应用:抗体药物、疫苗生产。


4. Sartorius

  1. 工业级层析系统

    • 特点:支持大批量蛋白生产,自动化程度高。

    • 应用:适合工业酶和治疗性蛋白生产。

  2. 实验室级层析系统

    • 特点:紧凑设计,适合研究级别的蛋白质纯化。

    • 应用:高纯度蛋白提取。


5. Agilent Technologies

  1. Agilent 1260 Infinity II

    • 特点:高性能液相色谱系统,适合蛋白质和多肽的分离纯化。

    • 应用药物开发和蛋白质组学研究。


6. Novasep

  1. BioSC平台

    • 特点:专为连续纯化设计,适合高通量操作

    • 应用:生物药物的连续生产。


三、蛋白质纯化系统的选择指南

1. 根据实验规模选择

  • 小规模实验:选择实验室级系统(如ÄKTA pure、Bio-Rad NGC)。

  • 中试规模:选择中试级系统(如ÄKTA avant、Sartorius小型工业系统)。

  • 工业生产:选择大规模工业级系统(如ÄKTAprocess、Thermo Fisher工业系统)。

2. 根据目标蛋白特性选择

  • His标签蛋白:优先使用亲和层析系统(如Ni²⁺柱)。

  • 电荷特性明显:选择离子交换层析系统。

  • 复杂混合物:选择多功能纯化系统。

3. 根据预算选择

  • 实验室级系统价格较低(通常在20万–80万元人民币)。

  • 工业级系统成本较高(通常在100万元人民币以上)。


四、蛋白质纯化系统的应用领域

  1. 基础研究

    • 提取目标蛋白用于功能研究、结构解析和生物活性分析。

  2. 生物制药

    • 分离和纯化抗体、疫苗、重组蛋白,用于药物开发。

  3. 工业酶生产

    • 高效提取用于食品、化学工业的酶类。

  4. 蛋白质组学

    • 从复杂样本中分离蛋白质组分,用于质谱分析。

  5. 诊断试剂开发

    • 制备高纯度的酶标抗体、抗原,用于体外诊断试剂盒。


总结

蛋白质纯化系统根据应用需求分为实验室级、中试级和工业级,涵盖多种分离技术,能够满足基础研究、生物制药和工业生产的需求。常见品牌如GE Healthcare的ÄKTA系列、Bio-Rad的NGC系统和Thermo Fisher的ProPac系统,提供了灵活、高效的解决方案。选择合适的系统需综合考虑实验规模、目标蛋白特性和预算等因素,以确保实验效率和纯化效果。