
蛋白质纯化系统AKTA pure仪器简介
ÄKTA Pure 蛋白质纯化系统简介
ÄKTA pure 是 GE Healthcare(现 Cytiva)开发的一款灵活且高性能的蛋白质纯化系统,专为实验室级别的蛋白质纯化设计。它提供多种层析模式,可支持不同规模的蛋白质分离和纯化需求,是生命科学研究中常用的设备之一。
一、ÄKTA Pure 的主要特点
模块化设计
用户可根据实验需求自由配置模块(如泵、检测器、分离柱等),实现个性化定制。
支持多种分离技术,包括离子交换、亲和层析、凝胶过滤等。
高精确性
采用高精度泵系统和检测器,保证流速、压力和洗脱控制的精确性。
温度和梯度调控精确,适用于复杂蛋白样本。
高灵活性
支持从小规模实验到中试规模的纯化需求。
可纯化多种类型的蛋白,如抗体、重组蛋白、多肽。
实时监控与分析
配备UV检测器,可实时监测蛋白质的吸光值(280 nm)。
支持pH值、电导率和梯度浓度的在线检测。
UNICORN 控制软件
提供直观的用户界面,方便操作。
允许自动化设置程序,包括样品加载、梯度洗脱和目标组分收集。
实时记录数据,便于结果分析和方法优化。
二、ÄKTA Pure 的核心组成
双泵系统
泵A和泵B:分别用于加载样品和缓冲液,可实现梯度洗脱控制。
流速范围:支持低至0.001 mL/min和高至25 mL/min的操作,满足不同规模实验需求。
分离柱
支持多种层析柱类型(如预装柱和自装柱)。
最大压力范围:可支持中低压层析分离。
UV检测器
用于实时检测目标蛋白的吸光度(常用于280 nm波长检测蛋白浓度)。
电导率和pH检测器
实时监测洗脱缓冲液的pH值和电导率变化,确保分离条件稳定。
自动分级收集器
自动收集不同洗脱组分,避免人为误差。
支持多孔板或试管的灵活使用。
梯度混合器
用于实现线性或非线性梯度洗脱,优化分离条件。
三、ÄKTA Pure 的主要功能
多层析模式支持
离子交换层析(IEX):分离具有不同电荷的蛋白。
亲和层析(Affinity Chromatography, AC):分离特定配体结合蛋白,如His标签蛋白。
凝胶过滤层析(Size Exclusion Chromatography, SEC):按分子量大小分离蛋白。
疏水作用层析(Hydrophobic Interaction Chromatography, HIC):根据蛋白表面疏水性分离。
实时监测与数据分析
实时显示UV吸光度、电导率和pH值,确保精确分离。
数据记录与方法存储,便于重复实验和结果比较。
四、应用范围
基础科学研究
高纯度蛋白质提取,用于功能研究和结构分析(如晶体学、NMR)。
分离酶、抗体和多肽,用于活性检测。
生物制药
抗体纯化:如单克隆抗体的分离与纯化。
重组蛋白纯化:提取治疗性蛋白质,如胰岛素、细胞因子。
蛋白质组学
从复杂生物样本中富集目标蛋白,用于质谱分析和蛋白质组研究。
工业应用
用于小规模生产生物药物或诊断试剂。
分离工业酶,如食品加工或化学工业中的酶制剂。
五、ÄKTA Pure 的优势
操作简单
模块化设计,适配用户需求。
直观的UNICORN软件界面,降低实验操作难度。
高灵敏度和分辨率
实时检测UV吸光度、电导率和pH值,优化分离精度。
梯度洗脱和压力控制精确,适合复杂样品分离。
灵活扩展性
支持多种分离模式和层析柱,满足不同实验需求。
可升级组件,适应未来实验扩展。
数据可追溯性
所有操作记录与分析数据均可储存,支持实验室规范化管理。
六、ÄKTA Pure 型号及规格
ÄKTA pure 25
适用于高流速、高样品加载量的纯化需求。
主要用于中试规模和高产量实验。
ÄKTA pure 150
专为高压条件设计,适用于较高复杂度的纯化任务。
适合从研究级别到初步生产规模的过渡。
七、使用注意事项
确保样品无颗粒或沉淀,避免堵塞层析柱。
使用过滤的缓冲液,防止泵和检测器损坏。
设备清洁
每次实验后,用适当缓冲液清洗系统和分离柱。
定期维护检测器和泵系统。
柱存储
使用推荐的储存缓冲液,延长分离柱寿命。
实验优化
针对目标蛋白优化梯度和分离条件,提高分离效率。
八、总结
ÄKTA pure 是一款性能强大且灵活的蛋白质纯化系统,广泛应用于生命科学研究和生物制药领域。凭借其模块化设计、高精度的分离能力和自动化操作,它能满足各种蛋白纯化需求,从基础研究到中试规模的生产,提供高效、可靠的解决方案。
