使用赛默飞(Thermo Fisher)酶标仪进行96孔板实验时,需要遵循一系列详细步骤。以下是一个完整的操作流程,帮助您有效使用酶标仪进行实验。
1. 准备工作
1.1 材料准备
酶标仪:确保酶标仪处于良好工作状态,并已校准。
96孔板:选择合适的96孔板,确保无损伤且干净。
样品:准备待测样品,包括标准品和对照组。
试剂:准备必要的缓冲液、底物和酶试剂等。
1.2 实验室环境
确保实验室温度和湿度适宜,避免环境因素对实验结果的影响。
2. 操作步骤
2.1 设备启动
开启酶标仪:按下电源按钮,启动设备。
等待自检:设备启动后,会自动进行自检,确认所有功能正常。
2.2 软件设置
打开软件:在设备上启动相应的实验管理软件(如 Thermo Scientific™ Multiskan GO 软件)。
创建新实验:
点击“新实验”或“新建项目”,输入实验名称和实验目的。
选择检测模式:根据实验要求选择合适的检测模式(吸光度、荧光等)。
2.3 设定实验参数
选择波长:设定所需的检测波长(如450 nm、620 nm等)。
设定实验时间:根据实验要求设定读取时间。
输入样品信息:输入样品位置和浓度信息。
2.4 准备样品
样品稀释:根据实验要求,对待测样品进行适当稀释。
加样:使用移液器将样品和试剂按照预定的体积和顺序加入96孔板中。注意:
先加入样品或试剂,避免交叉污染。
确保每孔内的液体均匀分布。
2.5 孵育
根据实验要求,进行适当的孵育。常见的孵育时间和温度有:
37°C孵育1小时(酶反应)
4°C或室温放置以防止反应过快。
3. 测量步骤
3.1 放入酶标仪
确认孔板:确保96孔板上的样品信息与软件设置一致。
放入仪器:将孔板小心放入酶标仪的测量槽中,确保孔板放置稳固。
3.2 开始读取
启动测量:在软件中点击“开始测量”或“读取”按钮。
监控过程:观察软件界面,确认测量进程正常。
4. 数据分析
4.1 查看结果
结果输出:测量完成后,软件将自动生成结果,包括各孔的吸光度或荧光值。
保存数据:将结果保存为数据文件,便于后续分析。
4.2 数据分析
绘制标准曲线:根据标准品的测量结果绘制标准曲线,计算样品浓度。
统计分析:使用软件进行数据统计和分析,生成报告。
5. 清洁与维护
5.1 清洁孔板
使用适当的清洁液体清洗96孔板,确保没有残留物。
5.2 设备维护
关闭设备:完成实验后,按照说明关闭酶标仪。
定期维护:定期进行设备的校准和维护,确保长期稳定运行。
6. 注意事项
在加样过程中,避免气泡产生,以防影响测量结果。
确保使用合适的移液器和耗材,避免交叉污染。
熟悉软件操作,确保能够快速应对意外情况。
以上步骤提供了一个详细的赛默飞酶标仪(Multiskan GO)96孔板实验的操作流程。通过遵循这些步骤,您可以有效地进行实验,并获得可靠的结果。